SEROLOGICAL STUDIES OF PLEUROPNEUMONIA IN SHEEP AND GOAT FLOCKS IN ALEPPO AND REQA REGIONS OF SYRIA

Department of Animal Diseases,

Veterinary College, AL-Bath University, Syria.

SEROLOGICAL studies of PLEUROPNEUMONIA in Sheep and Goat Flocks In Aleppo and Reqa Regions of Syria

(With 6 Tables)

By

a. al hafez and Y. Alomar

(Received at 10/12/2011)

دراسة مصلية لمرض التهاب الرئة والجنبة المعدي عند الأغنام والماعز في مناطق حلب والرقة في سوريا

عبدالستار الحافظ ، يـاسـر العمــر

أجُريت الدراسة على 511 عينة دم من أغنام وماعزً بأعمار مختلفة في 17 قطيع من الأغنام والماعز/356 عينة أغنام و155 عينة ماعز/ في 5 مناطق ضمن محافظتين. من بين 511 عينة مصل تم جمعها من أغنام وماعز مصابة وتم أختبارها من أجل الکشف عن الأجسام المضادة لمايکوبلازما مايکوئيدس باستخدام أختبار الإليزا ؛ تبين أن 245 نعجة (68.82%) إيجابية مصلياَ و111 نعجة (31.18%) سلبية مصلياَ و89 ماعز من 155 (57.41%) إيجابية مصلياَ و66 ماعزمن 155 ماعز (42.58%)  سلبية مصليا. وقد وُجِدَ أيضاَ أن المرض موجود في کل المناطق التي تم جمع العينات منها وکذلک وُجِدَ في 11 قطيع من أصل 12 قطيع أغنام تم دراستها؛ أي بنسبة إنتشار مصلي إيجابي لقطعان الدراسة (91.66%) کانت فيها حيوانات إيجابية وکذلک وُجِدَ في 4 قطعان ماعز من أصل 5 قطعان ماعز تم دراستها، أي بنسبة إنتشار مصلي إيجابي لقطعان الدراسة (80%) کانت فيها حيوانات إيجابية. سجلت الدراسة عوامل خطورة کامنة مرافقة للمرض کان من أهمها العمر الإنتاجي وحجم القطيع.

SUMMARY

The study was conducted on 511 Blood samples, Which were collected from suspected sheep and goat flock distributed in 2 province in different ages in 17 sheep and goat flocks /356sample of sheep and 155 sample of goat/ in 5 regions within tow province (mohafazat) the study was confirmed that the positive seroprevalence in 245/356 ewes was (68.82%) wherease the study confirmed that the positive seroprevalence in 89/155 goats was (57.41%) and 111 ewes were reported negative reaction to ELISA test (31.18%) and 66/155goats were reported negative reaction to ELISA test (%42.58). The positive cases were reported in all study regions and the positive cases were reported in11Flocks of 12 study population sheep as seropositive percentage (91.66%) Flocks level wherease goat positive cases were reported in 4 Flocks of 5 study population goat as seropositive percentage (80%) flocks level. The major potential risk factors reported in the mentioned as study productivity age and flock size.

Key words: Pleuropneumonia, Mycoplasma mycoides, sheep, goat.

Introduction

مقدمـة

تسبب المايکوبلازمـا أمراض ذات أنتشار واسع في کل من الإنسان والحيوان وارتبطت بذات الرئة عموما والتهاب المفاصل والرمد والعقم والإجهاض (Lerman and Beldjord, 1999; Fisher and Lerman, 1983) کل مجموعات المايکوبلازما ممرضة والأثوياء الأساسيون هم الماشية, الماعز والأغنام, المايکوبلازما مايکوئيدس المستعمرات الصغيرة (sc) تسبب إلتهاب الرئة والجنبة البقري (CBPP) وهو مرض ذو أهمية إقتصادية کبيرة واسعة الإنتشار في إفريقيا وآسيا والشرق الأوسط والذي أثار قلقاً کبيراً في أوربا بعد حالات التفشي الأخيرة في فرنسا والبرتغال وأسبانيا وإيطاليا .(Ter Laak, 1992) غالبية عترات المايکوبلازما مايکوئيدس المستعمرات الصغيرة (SC) عزلت من الماشية لکن عزلت أيضا من الماعز (Cottew, 1979). أول مرة عرفت المايکوبلازما في عام 1896 من قبل Roux و Nocard عند أبقار مصابة بالتهاب الجهاز التنفسي وأطلق عليها العامل المشابه لذات الرئة (P.P.L.O) (et al., 1896 Nocard). أصلا صنفت المايکوبلازما کفيروسات وذلک بسبب عبورها المرشحات الفيروسية، ولم يکن متاح زرعها بواسطة الآجـار الصلـب والممکـن فقـط في ذلک الوقـت إستعمـال المجهـر الضـوئي (Harwick et al., 1972 ; Eaton et al., 1945 ; Nocard et al., 1896;       Goodburn  and  Marmion,  1962 )

إسم مايکوبلازما جاء من اليونانية من کلمة  Mykesوتعني فطر وکلمة  بلازما Plasma (تعني شکل) أي شکل الفطر, أول مرة استعملت الکلمة من قبل A.B.frank عام 1889م هو کان يعتقد بأنها فطر (et al., 1973 Conrad). وأقدم إسم للمايکوبلازمـا کان العامـل المشابـه للتهـاب الرئـة والجنبة البقري  P.P.L.O (et al., 1956 Edward).

المسبب هو مجموعة المايکوبلازما التي تشمل المفطورة ميکوئيديس تحت النوع ميکوئيديسMycoplasma mycoides subsp. mycoides  ذات المستعمرات الکبيرة LC والمفطورة الماعزية تحت النوع الماعزيM. capricolum subsp. Capricolum والمفطورة ميکوئيديس تحت النوع الماعزيMycoplasma mycoides subsp. Capri  .(Bergonier et al., 1997)مجموعة المايکوبلازما مايکوئيدس تتضمن 6 مجموعـات هي: المايکوبلازمـا مايکوئيـدس تحـت النـوع الماعزي M. mycoides subsp. Capri , والمايکوبلازما مايکوئيدس المستعمرات الصغيرة mycoides small colony (SC) strains M. mycoides subsp. , والمايکوبلازما مايکوئيدس تحت النوع مايکوئيدس المستعمرات الکبيرة mycoides large colony (LC) strains  M. mycoides subsp. , وکذلک المجموعة السابعة المصلية البقرية Bovine serogroup 7 , والمايکوبلازما capricolulm subsp  M. capricolulm, والعترة  f38التي لاحقا اعيد تسميتها ب(Leach et al., 1993) M. capricolum subsp. Capripneumonia . يدخل مرض المايکوبلازما إلى المزارع الخالية من المرض عن طريق الحيوانات السليمة ظاهريا والمصابة إصابة تحت سريرية وبعد فترة حضانة تتراوح من 2-28يوم تنتقل الإصابة إلى الصغار بالدرجة الأولى عن طريق الحليب حيث يوجد في الحليب عدد کبير من المايکوبلازما، الحيوانات البالغة تصبح مصابة من خلال آلات الحلابة الملوثة وأيدي الحلابين، وهناک طرق أخرى مثل الإتصال المباشر بين الحيوانات السليمة والمصابة وکذلک الرذاذ الملوث، کمايلعب سوء التغذية والإجهاد وعوامل المناخ أدوار رئيسية في تفشي المرض بين الحيوانات Rosendal et al., 1979)). الحيوانات الصغيرة هي الأکثر عرضة للإصابات الخطيرة بالمايکوبلازما تحت النوع الماعزي من الحيوانات اليافعة لکن إلتهابات الضرع يمکن أن تؤثر على 30-25% منها(Smith and Sherman, 1994)  وأن تفشي المرض يأتي بعد مقدمة دخول حيوان مصاب إلى قطيع قابل للإصابة حيث تنتقل المايکوبلازما لمسافة قصيرة من خلال طرح القطيرات الملوثة أثناء السعال، المرض وبائي ويحدث بسهولة، حيث فترة قصيرة للإتصال کافية للإنتقال الناجح للمرض lske, 1996) (Thiaucourt and Bo. لقد تبين أن الحيوانات الأخرى مثل الماشية والجمال والمجترات البرية الصغيرة تعمل کخوازن للعامل المسبب ومصدرًا للعدوى (Perrin et al., 1994). إن مرض إلتهاب الرئة والجنبة المعدي (CBPP) يحدث في الماشية تحت الظروف الطبيعية ويحدث کذلک في الجاموس والرنة والثور الأمريکي، علاوة على ذلک ذکروا أن المرض يحدث في الأغنام والماعز تحت الظروف التجريبية حيث أن العمل التجريبي في أستراليا أظهر أن الجواميس يمکن أن تصاب بالسوائل الأصطناعية دون أن تنشر المرض إلى الجواميس الأخرى الموجودة معها على إتصال(Newton, 1992) . عند الأغنام والماعز تتراوح فترة الحضانة من 2-28يوم Rosendal et al., 1979)). يکون سير المرض حاد أوفوق حاد يؤدي إلى إصابات معقدة في الأعمار الصغيرة، حيث يلاحظ في الشکل الحاد أعراض ضعف عام ويمکن أن يترافق مع تسمم دموي وبعد أقل من إسبوع تصاب الحيوانات بترفع حروري يصل إلى أکثر من 41ْم ثم يستلقي الحيوان على وجهه (Surgeon Hutcheon, 1889). في الحيوانات البالغة أکثر الأعراض شيوعا هي إلتهاب ضرع وإلتهاب رئوي جنبي وإلتهاب مفاصل قيحي والإجهاض (Smith and Sherman, 1994).

الحيوانات الحوامل أو القريبة من الولادة يمکن أن تجهض بينما يموت بعضها الآخر دون أعراض واضحة، وأکثر الأعراض الملاحظة هي إلتهاب ضرع يتبعه إلتهاب مفاصل وإلتهاب قرنية العين(Mercier et al., 2001) . في الصغار يلاحظ التهاب مفاصل وتسمم دموي والتهاب سحايا والتهاب ملتحمة تقرني وکذلک حمى وفقدان للشهية وألم حاد وتورم مفاصل واستسقاء وضيق تنفس وأغلب الأحيان الموت نتيجة التسمم الدموي(Nayak and Bhowmik, 1990) .

ومن أهم التقانات التشخيصية الأکثر حساسية والمستخدمة للکشف عن المرض باستخدام تقانات تشخيصية مصلية مباشرة (بالکشف عن المستضد) أو غير مباشرة (بالکشف عن الأضداد) هي أختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنظيم ((ELISA (Rodriguez et al., 1996a). کما أستخدمت تقانات أخرى في التشخيص کتفاعل البوليميراز التسلسلسي (Polymerase Chain Reaction). (Tola et al., 1997) بالإضافة لإختبار تثبيت المتممة (Complement fixation) والتألق المناعي اللامباشر(Lefevre et al., 1987)  .

أهداف الدراسة  Objectives of the study:

1- تحديد انتشار المايکوبلازما في المنطقة الشمالية والشرقية من سوريا

2- دراسة عوامل الخطورة لامراض المايکوبلازما مايکوئيدس عند الاغنام والماعزفي المنطقة الشمالية والشرقية من سوريا.

3- دراسة التقييم الاقتصادي لمايکوبلازما مايکوئيدس عند الاغنام والماعز فيالمنطقة الشمالية والشرقية من سوريا

4- وضع توصيات للتحکم والوقاية من امراض المايکوبلازما مايکوئيدس عند الاغنام الماعز في المنطقة الشمالية والشرقية من سوريا

Materials and Methods

مواد وطرئق البحث

مواد البحث Materials :

جمع العينات  Sampling collection:

تم جمع 511 عينة مصل من 12 قطيع من الأغنام والماعز من محافظات سورية (حلب والرقة). جميع العينات التي تم جمعها کانت من أغنام القطاع الخاص، والأغنام کانت بأعمار مختلفة وتخضع لنظام تربية طليق ونصف مکثف وهي من سلالة الأغنام العواس کونه السلالة السائدة في سورية. الحيوانات کانت تتغذى على الأعشاب المحلية والغذاء المرکز لکن بشکل عشوائي. تم جمع العينات من الحيوانات المصابة بأعراض تنفسية حيث تم أخذ عينات الدم من الوريد الو داجي من الأغنام المصابة وهي في حالة الوقوف وبعدها تم حفظ الدم بشروط صحية وتم نقله إلى المخبر لفصل المصل وحفظه بدرجة حرارة -20 °م حتى إجراء الاختبار.

مواد العمل المخبري:

استخدم في هذه الدراسة مجموعة تشخيصية لاختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنظيم (ELISA) لشرکة Pourquier Institute الفرنسية. وضمت محتويات المجموعة التشخيصية (محتويات کيت إليزا "ELISA KI): 

 المواد التالية:  

1- طبق الإليزا ELISA  يحتوي على 96 حفرة ميکروليترية  مرقمة من             A1وحتى   H12مغطاة بمستضد المايکوبلازما مايکوئيدس المستعمرات الصغيرة.                                                                                                               

2- مصل الشاهد الإيجابي القوي Positive control) CP++ Stronge).

3- مصل الشاهد الإيجابي الضعيف ) CP+ Positive control Weak).

4- مصل الشاهد السلبي Negative control)) الخالي تماماً من الأجسام المضادة النوعية للمايکوبلازمامايکوئيدس المستعمرات الصغيرة.

5- محلول التمديد 24 (Dilution Buffer 24): يستخدم هذا المحلول من أجل تمديد أمصال العينات.                                                        

6- محلول الإقتران المضاف له المصل: (5/mab117) /monoclonal anti- Mmmsc antibody).

7- محلول الغسيل (Washing Solution) ترکيز 20 x.

8- المقترن (Conjugate): الذي سيرتبط مع معقد (المستضد – الأضداد النوعية) والمقترن عبارة عن Protein G peroxidase conjugate.

9- محلول الکاشف اللوني للأنزيم Revelation solution 2 TMB)): الذي سيکشف کمية الإرتباط بين محلول الإقتران المرتبط بالأنزيم ومعقد (المستضد – الأضداد النوعية) عن طريق إظهار درجة التلوين والتي يمکن قياسها عبر قارئ الإليزا وهذا المحلول جاهز للإستخدام ولا يحتاج إلى تمديد.                      

10- محلول إيقاف التفاعل (Stop Solution): الذي يضاف بعد إنتهاء فترة حضانة الکاشف اللوني للأنزيم لإيقاف وإنهاء التفاعل الحاصل ويتألف من محلول حمض الکبريت 0.5 M (H2SO4  0.5 M solution).

 طرائق البحث Methods:

تم الکشف عن الأجسام المضادة النوعية للمايکوبلازمامايکوئيدس المستعمرات الصغيرة في مصل عينات الدم التي تم جمعها من الأغنام والماعز باستخدام تقنية إختبار الإليزاELISA  (Mycoplasma mycoides subspecies mycoides small colony(Mmmsc) kit, Pourquier Institute, France). ويعد هذا الإختبار هو المفضل في عمليات التقصي المصلي لأعداد کبيرة من العينات بالنسبة لمرض التهاب الرئة والجنبة المعدي عند الأغنام والماعز. ووفقاً لتعليمات الشرکة المنتجة تم إجراء الإختبار بتوزيع 100 ميکرو ليتر من محلول التمديد المنظم (المرمز بالرمز24) في کل حفرة من حفر الطبق الغير معد للإختبار.– إضافة 110 ميکروليتر من محلول التمديد المنظم (بالرمزبالرمز 24) بالحفرA1  و A2 (وهي تمثل شاهد الإقتران CC).

 - إضافة 11 ميکروليتر من الشواهد الثلاثCP++  في الحفر B1,B2,C1,C2 والشاهدCP+ في الحفر D1,D2,E1,E2 والشاهد السلبي  CNفي الحفر .H1,H2

- إضافة 11 ميکرو ليترمن کل عينة مصل ممددة إلى باقي الحفر من الحفرة  A3 إلى H12.

- عملية دمج وتوزيع الأضداد وحيدة النسيلة 117/5: يمدد محلول الإقتران بنسبة 1/120 بمحلول التمديد المنظم (المرمزبالرمز24 ).

- 1مل من محلول الإقتران مع  119مل من محلول التمديد المنظم (بالرمز 24( .

- يضاف 110 ميکرو ليتر من محلول الإقتران الى کل حفر الطبق ماعدا الحفرة A1,A2.

– عملية تحضين المصل المضاف له الأضداد وحيدة النسيلة. -نمزج باستخدام الميکروبيبيت ثم ننقل 100 ميکرو ليترمن عينات المصل المضاف لها محلول الإقتران من الطبق الأول الغير معد للإختبار (أي غير مزود بالکيت والذي تم تمديد العينات فيه في المراحل السابقة) إلى الطبق المزود مع الکيت والمغطى بالمستضد باستخدام الميکروبيبيت. - نغطي الطبق بورق الالمنيوم ثم نضع الطبق بالحضانة بدرجة37ْ لمدة ساعة واحدة مع هز الطبق بين فترة واخرى بشکل خفيف أثناء فترة التحضين. -ثم نوزع 10 ميکرو ليتر من مصل کل عينة غير ممددة  في کل حفرة ثم ننقل محلول التمديد إلى الطبق بواسطة ميکروبيبيت يحتوي 12 رأس وکذلک يتم نقل مصل الشواهد والعينات إلى الطبق بواسطة ميکروبيبيت له رأس واحد مع مراعاة الترتيب الرقمي واستبعاد رؤوس الماصات بعد الإنتهاء من نقل کل عينة. تم تجانس محتويات الحفر في الطبق بالهز اللطيف عن طريق وضعه على رجاج إلکتروني ومن ثم تمت تغطية الطبق برقاقة من ورق الألمنيوم وتم تحضين الطبق في الحاضنة لمدة ساعة في درجة حرارة 37°م.

-بعد انتهاء مدة التحضين تم إجراء عملية الغسيل الأولى کالتالي:                 

-  يمدد محلول الغسيل في 1900مل ماء مقطر (يحل 20مل من محلول الغسيل المرکزفي 380مل ماء مقطر) لکل طبق.

- نملأ حفر الطبق يدويا ُثم إفراغ کافة محتويات حفر طبق الإليزا جيداً بقلبه ومن ثم أجري التنشيف بقلب الطبق على ورق نشاف نظيف وجاف عدة مرات ومن ثم يتم ملء الحفر في الطبق بمحلول الغسيل ويتم إفراغها ثانية وتکرر عملية الغسيل ثلاث مرات لإزالة جميع الإرتباطات غير النوعية بين الأضداد والمستضد.    

-  بعد الإنتهاء من عملية الغسيل وتفريغ محتويات طبق الإليزا تم إضافة//100 ميکروليتر لکل حفرة من محلول الإقتران الممدد بنسبة 1/100 من محلول التمديد (Dilution Buffer 24) (120 ميکروليتر من محلول لاقتران في 11.88مل محلول تمديد 24) بواسطة ماصات 12 رأس واستبعاد رؤوس الماصات ومن ثم تم تغطية الطبق بورق الألمنيوم ووضعه في الحاضنة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة 37°م.

- بعد انتهاء مدة التحضين تم إجراء عملية الغسيل الثانية کالتالي:

تم إفراغ کافة محتويات حفر طبق الإليزا جيداً بقلبه ومن ثم أجري التنشيف بقلب الطبق على ورق نشاف نظيف وجاف عدة مرات ومن ثم يتم ملء الحفر في الطبق بمحلول الغسيل ويتم إفراغها ثانية  وتکرر عملية الغسيل ثلاث مرات.   

تم توزع 100 ميکروليتر من Revelation Solution N°2"" الجاهز للإستخدام (لا يحتاج إلى تمديد) إلى کل حفرة من حفر طبق الإليزا واستبعاد رؤوس الماصات. ويغطى الطبق برقاقة من الألمنيوم وثم تحضن الطبق بدرجة حرارة 37°C+ (±5°C) لمدة ثلاثين دقيقة بعيداً عن الضوء. بعد الإنتهاء من مدة التحضين تم إضافة 100 ميکروليتر من محلول إيقاف التفاعل Stop Solution إلى کل حفرة ومن ثم تم هز الطبق بلطف حتى يتجانس محلول التلوين ويجب المسح بحذر أسفل الطبق.تم قراءة نتيجة الإختبار على الطبق باستخدام جهاز قارئ الإليزا على طول موجة450nm  حيث تظهر قيم معدل الإمتصاص الضوئي OD (الکثافة الضوئية (Optical densities لکل حفرة من حفر طبق الإليزا ELISA.

-يحُسب متوسط قيم الشاهد cm(0%inhibition) والشاهد(cc(100%inhibition.

  ثم حساب النسبة المئوية لکل عينة مصل  کالتالي:

                      PI=100x{(ODCm-ODtest)/(ODCm-ODCc)}

- تعتبر النتائج ذات دقة موثوقة حسب المعايير التالية:                       

- إذا کانت الکثافة الضوئيةOD  للشاهد Cm بين 0.5-  .2.0

- إذا کانت الکثافة الضوئيةOD  للشاهد Cc أقل من0.3.

 - أن تکون النسبة المئويةpI للشاهد السلبي CN نساوي أو أقل من35 %.

- أن تکون النسبة المئوية pI للشاهد الإيجابي الضعيف CP+بين % 50-80.

- أن تکون النسبة المئوية pI للشاهد الإيجابي القوي CP++ بين % 60-90.

ثم تفسر النتائج کالتالي:

 -إذا کانت النسبة المئوية pI تساوي أو أقل من %40  تعد الحيوانات سلبية النتائج..

-إذا کانت النسبة المئوية pI بين %40 و  %50تکون الحيوانات مشتبهة.

-إذا کانت النسبة المئوية pI تساوي أو أکبر من 50% تعتبر الحيوانات إيجابية النتائج.                                 

Results

النتائــج

تم دراسة 17 قطيع أغنام وماعز في المنطقة الشمالية والشرقية في سورية في محافظتين هما محافظة حلب ومحافظة الرقة. عدد الأغنام في هذه القطعان هو 1308 وعدد الماعز في هذه القطعان 555 رأس ، تم جمع عينات الدم من الأغنام والماعز المريضة في هذه القطعان وعددها 511 عينة /356 رأس غنم و155 رأس ماعز/. وتبين بأن معدل الإصابة عند الأغنام هو 27.21% (356/1308) ومعدل الإصابة عند الماعز27.92% ( (155/555کما هو موضح في الجدول (1)

جدول (1): معدل الإصابة عند الأغنام في المنطقة الشمالية والشرقية من سورية.

جدول (2): معدل الإصابة عند الماعز في المنطقة الشمالية والشرقيةمن سورية.                    

جدول (3): نسب الإنتشار المصلي للإصابة بالمايکوبلازما مايکوئيدس حسب الفئة العمرية للأغنام

جدول (4): نسب الإنتشار المصلي للإصابة بالمايکوبلازما مايکوئيدس حسب     الفئة العمرية للماعز

جدول (5): نسب الإنتشار المصلي للحالات الإيجابية وارتباطها بحجم القطيع عند الأغنام

جدول (6): نسب الإنتشار المصلي للحالات الإيجابية وارتباطها بحجم القطيع عند ماعز

کما وجدت الأجسام المضادة للمايکوبلازمايکوئيدس في 11 قطيع من أصل 12 قطيع أغنام تم دراستها بمعدل  91.66% إيجابية وعند الماعز وجدت الأجسام المضادة للمايکوبلازمايکوئيدس في 4 قطعان من أصل5 قطعان تم دراستها بمعدل  80% من القطعان کان فيها حالات إيجابية. وتراوحت نسب الحالات الإيجابية عند أغنام الدراسة بين (49%-94 %) کذلک تراوحت نسب الحالات الإيجابية عند الماعز بين (9 %-84 %). في هذه الدراسة 68.82% (245/356) من أغنام الدراسة کانت إيجابية للأجسام المضادة النوعية للمايکوبلازمايکوئيدس والإنتشار المصلي للمايکوبلازمايکوئيدس في الأغنام تراوح بين (49 %-94 %) حيث کان الإنتشار المصلي في محافظة حلب 80.63 % (204/253) وفي محافظة الرقة 39.80% (41/103) کما وجد في هذه الدراسة بالنسبة للماعز 57.41% (89/155) من ماعز الدراسة کانت إيجابية للأجسام المضادة النوعية للمايکوبلازمايکوئيدس والإنتشار المصلي للمايکوبلازمايکوئيدس في الماعز تراوح بين (9 %-84 %) حيث کان الإنتشار المصلي في محافظة حلب 84% (84/100) وفي محافظة الرقة 9.09% (5/55).

التحليل الإحصائي Statistical Analysis:

استخدام إختبار بيرسون مربع کاي Pearsons chi squar لمقارنة نسب الانتشار المصلي الإيجابية مع الأعمار الإنتاجية لأغنام الدراسة لتحديد الأعمار الإنتاجية الأکثر قابلية للإصابة لمرض التهاب الرئة والجنبة المعدي بالإضافة إلى دراسة علاقة إنتشار المرض بحجم القطيع.

Discussion and Conclusion

المناقشـة والإستنتاجـات

تعد الأمراض التنفسية من الأمراض المستوطنة في الجمهورية العربية السورية وقد أصبح السعال والسيلانات الأنفية من الأعراض المألوفة لدى المربين نتيجة تکرار الإصابات سنوياً في الأغنام والماعز. ونتيجة عدم وجود أي دراسات کمية ونوعية للتقصي الوبائي لتحديد العامل المسبب لمرض التهاب الرئة والجنبة المعدي فالبعض عزى أن المرض ناجم عن عدوى الباستوريلا والبعض الأخر قال بأنه ناجم عن الديدان الرئوية وآخرون قالوا بأنه ناجم عن إصابات فطرية وغيرها من مسببات الأمراض التنفسية المعدية والغير معدية ؛ وبناءً على ذلک تمت معالجته بأساليب مختلفة بإعطاء المضادات الحيوية المختلفة أو مضادات الفطور أو بالفيتامينات أو بإعطاء لقاحات مختلفة ؛ وقد أدى کل ذلک إلى خسائر کبيرة  لعدم فعالية العلاجات واللقاحات المختلفة لأن فعالية أي علاج يعتمد على معرفة المسبب المرضي النوعي. ولهذا کان هدفنا في هذه الدارسة هو التقصي الوبائي المصلي عن المايکوبلازمايکوئيدس عند الأغنام والماعز ومقارنة الإنتشار المصلي للأجسام المضادة للمايکوبلازمايکوئيدس في کل منطقة من مناطق الدراسة بالمقارنة مع العمر الإنتاجي للأغنام والماعز. جرى دراسة 17 قطيع من الأغنام والماعز في المنطقة الشمالية والشرقية في سورية/12 قطيع أغنام و5 قطعان ماعز/ في محافظتين هما محافظة حلب ومحافظة الرقة. تتراوح أعداد الأغنام في هذه القطعان هو 1308 وعدد الماعز في هذه القطعان 555 رأس ، بلغ إجمالي تعدادعينات الدم المجموعة من الأغنام والماعز في هذه القطعان 511 عينة حيث توزعت على الشکل التالي/356 عينة أغنام و155عينة ماعز/. سجلت الدراسة معدل الإصابة النوعي  بالمايکوبلازما مايکوئيدس عند الأغنام 27.21% کما سجلت الدراسة معدل الإصابة النوعي بالمايکوبلازما مايکوئيدس عند الماعز 27.92% کما هو موضح في الجدول رقم (1). کما سجلت الدراسة أيضا وجود الأجسام المضادة للمايکوبلازما مايکوئيدس في 11 قطيع من أصل 12 قطيع أغنام جرى دراستها بنسبة 91.66 % من قطعان الدراسة. ووجود الأجسام المضادة للمايکوبلازما مايکوئيدس في 4 قطعان من أصل 5 قطعان ماعز جرى دراستها بنسبة  80%. سجلت الدراسة وجود 68.82% حالة إيجابية للأجسام المضادة النوعية للمايکوبلازما مايکوئيدس عند الأغنام کما سجلت الدراسة أيضا وجود 57.41% حالة إيجابية للأجسام المضادة النوعية للمايکوبلازما مايکوئيدس عند الماعز. وتراوح الإنتشار المصلي للمايکوبلازما مايکوئيدس في قطعان الدراسة عند الأغنام ما بين (49 %-94 %) حيث کان الإنتشار المصلي في محافظة حلب 80.63 % وفي محافظة الرقة 39.80% کما تراوح الإنتشارالمصلي للمايکوبلازما مايکوئيدس في قطعان الدراسة عند الماعز بين (9 %-84 %) حيث کان الإنتشار المصلي في محافظة حلب 84% وفي محافظة الرقة 9.09%. وقد وسجلت الدراسة أن أعلى انتشار مصلي إيجابي في محافظة حلب عند الأغنام  والماعز. وسجلت الدراسة أن أعلى انتشار مصلي  إيجابي في الأعمار الإنتاجية المتراوحة بين 6 شهور ومادون عند الاغنام بنسبة83.82  % کماسجلت الدراسة أن أعلى انتشار مصلي إيجابي عند الماعز في الأعمار الإنتاجية المتراوحة بين 8 شهور ومافوق بنسبة 68.99 % مقارنة مع الأعمار الإنتاجية الأخرى. أثبتت الدراسة أن الإنتشار المصلي للحالات الإيجابية يزداد مع ازدياد حجم القطيع حيث انعدم الإنتشار المصلي في القطعان التي يقل عددها عن 75  رأس. توافقت هذه الدراسة مع دراسة أجريت على ماعزفي شرق ترکيا باستخدام تقنية تفاعل السلسلة PCR کان معدل حدوث الإصابة 67.7% وذلک نظراً لقرب ترکيا من سوريا وحرکة التجارة والنقل بين البلدين (Ozdemir et al., 2005). ولم تتوافق هذه الدراسة مع نفس الدراسة التي أجريت قي شرق ترکيا على الأغنام والتي کان معدل حدوث مرض التهاب الرئة والجنبة عندها 16.7% (Ozdemir et al., 2005). أما بالنسبة لحجم القطعان فقد خالفت نتائج هذه الدراسة نتائج الدراسة التي أجريت في شرق ترکيا بالنسبة للماعـز حيث کانت 37.5% ولم تتـوافق نتائج هذه الدراسـة مع نتـائج الدراسـة ذاتها بالنسبة لحجم القطعان عند الأغنام فقد کانت النسبة 15.4% Ozdemir et al. (2005). توافقت هذه الدراسة مع دراسة أجريت على ماعز حلوب غرب فرنسا حيث تم عزل العامل المسبب لإلتهاب الرئة والجنبة بنسبة تزيد على 50% (Mercier et al., 2001). ولم تتوافق هذه النسبة مع دراسة أجريت بجزر اسبانيا على الماعز وکانت النسبة 7 %1999)  et al., Gil). ولم تتوافق هذه الدراسة مع دراسة اجريت على ماعز بجزر الکناري حيث کانت الاصابة بمعدل 16٪ 1994) (Real et al.,. ولم تتوافق معدلات الإصابة في هذه الدراسة مع دراسـة أجـريت بالمکسيـک حيث کــان معـدل الإصابــة 15-16٪ Solana and Rivera, 1967)). ولم تتوافق معدلات الإصابة هذه مع دراسة أجريت على أغنـام في النرويـج حيث کان معـدل الإصابة الرئوية 98٪ (Bakke et al., 1982) . توافقت معدلات الإصابة في هذه الدراسة عند الإغنام مع دراسة أجريت على الماشية في أثيوبيا وتنزانيـا حيث کان معـدل الإصابـة 58٪ (Bidjeh et al., 2003). لم تتوافق هذه النتائج مع دراسة أجريت على الماشية لکشف التهاب الرئة والجنبة في تنزانيا 1995 حيث کان معدل الإصابة 30٪ Bidjeh et al., 2003)). لم تتوافق هذه النتائج مع دراسة أجريت على الماشية لکشف التهاب الرئـة والجنبة في غانـا 2002 حيث کانت نسبـة الاصابـة 26٪  (Bidjeh et al., 2003). ولم يتوافق معدل الإصابة في هذه الدراسة مع معدل الإصابة بالتهاب الرئة والجنبة المعدي عند الماعز التي قام بها بعض الباحثون والتي کانت 100٪ .(Kaliner and MacOwan, 1976; Msami et al., 2001)

ولم يتوافق معدل الإصابة في هذه الدراسة مع دراسة أجريت بالولايات المتحدة من حيث الفئة العمرية حيث کان معدل الإصابة بالتهاب الرئة والجنبة المعدي عند المواليد الصغيرة بالعمر 90٪ في الماعز بينما توافقت مع معدل الإصابـة عنـد حمـلان الأغنـام حيـث کـان معـدل الإصابــة 90٪1983a)  DaMassa et al.,). ولم يتوافق معدل الإصابة في هذه الدراسة مع معدل الإصابة بالتهاب الرئة والجنبة المعدي من حيث الفئة العمرية عند الماعز حيث وجد بعض الباحثين في عام 1955 أن التهاب الرئة والجنبة المعدي کان على شکل وباء في الحملان بالأعمار الصغيرة بينما يتوافق ذلک مع دراستنا على الحملان الصغيرة et al., 1955) Cordy).

References  

المراجــع

Bergonier, D.; Berthelot, X. and Poumarat, F. (1997): Contagious agalactia of small ruminants: current knowledge concerning epidemiology, diagnosis and control. Rev. Sci. Tech. 16:    848–873.

Bakke, T. and Nostvold, S. (1982): An investigation of ovine pneumonia in four herds from Central Norway. I. Prevalence of pneumonia and microbiological findings. Acta vet.scand., 23: 248-258.

Bidjeh, K. (2003): Analyse des stratégies de lutte contre la péripneumonie contagieuse bovine (PPCB) dans les pays membres du PACE. InTowards sustainable CBPP control programmes for Africa. Proc. FAO-OIE-AU/IBAR-IAEA Consultative Group on Contagious Bovine Pleuropneumonia, 3rd Meeting, 12-14 November, Rome. FAO, Rome, 201.

Cottew, G.5. (1979): Caprine-ovine mycoplasmas. In The Mycoplasmas, Vol. 2, pp. 103-132. Edited by J. G. Tully & R. F.Whitcomb. London: Academic Press.

Conrad J. Krass and Max W. Gardner (1973): Etymology of the TermMy coplasma Int. J. of Syst. Bact.; 23, 1: 62-64.

Cordy, DR.; Adler, HE. and Yamamoto, R. (1955): A pathogenic pleuropneumonialike organism from goats. Cornell Vet. 45:50-68.

DaMassa, AJ.; Brooks, DL. and Adler, HE. (1983a): Caprine mycoplasmosis:widespread infection in goats with Mycoplasma mycoides subsp. mycoides (large colony type). Am. J. Vet. Res. 44: 322-325.

Eaton, M.D.; Meiklejohn, G.; Van Herick, W. and Corey, M. (1945): Studies on the etiology of primary atypical pneumonia. J. Exp. Med. 82: 329-42.

Edward, DG. and Freundt, EA. (1956): "The classification and   nomenclature of organisms of the pleuropneumonia group". J. Gen.  Microbiol. 14 (1): 197–207.

Fisher, S.G. and Lerman, L.S. (1983): DNA fragments differing by single base-pair substitutions are separated in denaturing gradient gels: correspondence with theory. Proceedings of the National Academy of SciencesUSA80: 1579–1583.

Goodburn, G.M. and Marmion, B.P. (1962): Investigations of the nature of Eaton's primary atypical pneumonia organism. J. Hyg. Epidemiol. Microbiol. Immunol. 6: 176-82.

Gil, M.C.; Hermosa De Mendoza, M.; Rey, J.; Alonso, J.M.; Poveda, J.B. and Hermosa De Mendoza, J. (1999): Aetiology of caprine contagious agalactia syndrome in Extremudura, Spain. Veterinary Record144: 24–25.

Harwick, H.J.; Kalmanson, G.M. and Guze, L.B. (1972): Human diseases associated with mycoplasmas. Calif. Med. 116: 1-7.

Hutcheon, D. (1889): Contagious pleuropneumonia in goats at CapeColony, South Africa.Veterinary Journal29: 399–404

Kaliner, G. and MacOwan, KJ. (1976): The pathology of experimental and natural contagious caprine pleuropneumonia in Kenya. Zentralbl. Veterinarmed. (B), 23:652-661.

Lerman, L.S. and Beldjord, C. (1999): Comprehensive mutation detection with denaturing gradient gel electrophoresis. In: Cotton, R.G.H., Edkins, E. and Forrest, S. (eds) Mutation Detection. Oxford University Press, Inc., New York, pp.      35–61.

Leach, R.H.; Ernø, H. and Mac Owan, K.J. (1993): Proposal for designation of F38-type caprine mycoplasmas as Mycoplasma capricolum subsp. Capripneumoniae subsp. nov. and consequent obligatory relegation of strains currently classified as M. capricolum (Tully, Barile, Edward, Theodore, and Erno 1974) to an additional new subspecies, M. capricolum subsp. Capricolum subsp. nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 43: 603–605.

Lefevre, P.-C.; Jones, G.E. and Ojo, M.O. (1987): Les mycoplasmoses pulmonaires des petits ruminants. Mycoplasmoses of ruminants. Revue Scientifi que et Technique. Office International des Epizooties6: 713–757.

Msami, HM.; Kapaga, AM.; Heldtander, M. and Bölske, G. (2001): Contagious caprine pleuropneumonia in Tanzania. Vet. Rec.148: 22-23.

Mercier, P.; Lenfant, D.; Poumarat, F. and Perrin, G. (2001): Prevalence of mycoplasmal infection within French milking caprine herds In: Poveda, J.B., Fernandez, A., Frey, J. and Johnansson, K.-E. (eds) Mycoplasmas of Ruminants: Pathogenicity, Diagnostics, Epidemiology and Molecular Genetics, Vol. 5. European Commission, Brussels, pp.        130–133.

Nayak, N.C. and Bhowmik, M.K. (1990): Goat fl ea (order Siphonaptera) as a possible vector for the transmission of caprine mycoplasmal polyarthritis with septicaemia. Preventive  Veterinary Medicine 9: 259–266.

Newton, L.G. (1992): Contagious bovine pleuropneumonia in Australia: some historic highlights from entry to eradication. Australian Veterinary Journal 69: 306–317.

Nocard, E.; Roux, E.; Borrel, A.; Salimbeniet, T. and Dujardin–Beaumetz, E. (1896): Le Microbe de la Peripneumonie. Annales de l'Institut Pasteur. 12: 240-62. Translation: W.

Ozdemir, U.; Ozdemir, S.; March, J.; Churchwood, C. and Nicholas, R.A.J. (2005): Outbreaks of CCPP in the Thrace region of Turkey. Veterinary Record156: 286–287.

Perrin, J.; Muller, M.; Zangger, N. and Nicolet, J. (1994): Infection a Mycoplasma mycoides subsp.mycoides LC chez des cabris bezoard (Capra aegagrus cretica) au jardin zoologique de Berne. Schweizer Arch. Tierheilk. 136: 270–274.

Real, F.; Deniz, S.; Acosta, B.; Ferrer, O. and Poveda, J.B. (1994): Caprine contagious agalactia caused by Mycoplasma agalactiae in the Canary Islands. Veterinary Record135:     15–16.

Rodriguez, F.; Ball, H.J.; Finlay, D.; Campbell, C. and Mackie, D.P. (1996a): Detection of Mycoplasma mycoides subspecies mycoides by monoclonal antibody-based sandwich ELISA. Veterinary Microbiology51: 69–76.

Rosendal, S.; Erno, H. and Wyand, D.S. (1979): Mycoplasma mycoides subsp. mycoides as a cause of polyarthritis in goats. Journal of the American Veterinary Medical Association 175: 378–380

Solana, P. and Rivera, E. (1967): Infection of goats in Mexico by Mycoplasma mycoides var. capri. Ann.N.Y. Acad. Sci.,143: 357-363.

Smith, M.C. and Sherman, D.M. (1994): Bacterial diseases. In: Goat Medicine. Lea and Febiger, Philadelphia, USA, p. 86.

Tola, S.; Angioi, A.; Rocchigiani, A.M.; Idini, G.; Manunta, D.; Galleri, G. and Leori, G. (1997): Detection of Mycoplasma agalactiae in sheep milk samples by polymerase chain reaction. Veterinary Microbiology54: 17–22.

Thiaucourt, F. and Bölske, G. (1996): Contagious caprine pleuropneumonia and other pulmonary mycoplasmoses of sheep and goats. Rev. Sci. Tech. 15: 1397-1414. 

Ter Laak, E.A. (1992): Contagious bovine pleuropneumonia: a review. VetQ 14: 104-110.