SEROLOGICAL STUDY ON BOVINE ENZOOTIC LEUKOSIS OF CATTLE IN SYRIA

SEROLOGICAL STUDY ON BOVINE ENZOOTIC LEUKOSIS OF CATTLE IN SYRIA

___________________________________________________________________________

                                         ABSTRACT

___________________________________________________________________________

دراسة مصلية لمرض ابيضاض الدم المستوطن عند الأبقار في سوريا

هاجر شهاب ، ياسر العمر

شملت الدراسة على 651 عينة دم والتي جمعت من مزارع المؤسسة العامة للمباقر وقد توزعت في مختلف محافظات سورية. سجلت الدراسة انتشار مصلي باستخدام تقنية المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم (الاليزا) لمرض ابيضاض الدم المستوطن عند الأبقار في مزارع القطاع العام بنسبة 31.12%, وسجلت الحالات الإيجابية في أربع مزارع من أصل 11 مزرعة موزعة جغرافيا في کل من مناطق حماه وطرطوس واللاذقية ودمشق. سجلت الدراسة انتشار مصلي يقدر بنسبة 15% باستخدام التقنية المذکورة في مزارع القطاع الخاص. أظهرت نتائج الانحدار اللغارتيمي المتعدد لقياس قوة الترافق لبعض عوامل الخطورة الکامنة لمرض ابيضاض الدم المستوطن أن عامل العمر الإنتاجي دون الموسم الإدراري الثالث أکثر ترافقا لحدوث المرض, وسجلت الحالات الإيجابية للمرض مستويات مرتفعة في فصل الصيف مقارنة مع الحالات المسجلة في فصل الشتاء مما يشير إلى أهمية عامل الفصل في نقل المرض, کما سجلت الدراسة أن عامل الازدحام يعد من العوامل الهامة في زيادة تسجيل الحالات الإيجابية مقارنة مع القطعان الأقل عددا.

INTRODUCTION

المقدمـة

يعد مرض ابيضاض الدم المستوطن من الأمراض المعدية التي يجب الإبلاغ عنها حسب قوائم الأمراض المعدة من قبل مکتب الأوبئة الدولي (OIE, 2000). يعود تاريخ هذا المرض إلى القرن التاسع عشر. حيث سجلت الأعراض السريرية في عام 1970 وتم التعرف على المسبب المرضي عام 1969. وينتشر المرض في أوربا والولايات المتحدة الأمريکية وفي العديد من بلدان العالم ومنها سورية حسب ما سجلته العديد من الدراسات العلمية منذ نهايات التسعينات وحتى يومنا هذا (Iyisan et al., 1997; Kurdi et al., 1998 and Brenner et al., 2002).

ذکرت العديد من النشرات العلمية إن المسبب المعدي فيروس ينتمي إلى الفيروسات الحاوية على الحمض النووي (RNA) والمصنفة من جنس الفيروس المنتکس دلتا (Deltaretrovirus) وضمن عائلة الفيروسات المنتکسة (Retroviridae). وتمتاز هذه الفيروسات بأن لها ميول للتواجد في الخلايا الليمفاوية والبلاعم وخلايا الجهاز الشبکي البطاني. إن أحد الميزات الأساسية لهذه الفيروسات أن لها قدرة على تشکيل ما يدعى بالخلايا العملاقة وهذا يلعب دورا کبيرا في تشخيص المرض دمويا (Coffin, 1990; Fechner, 1995 and Mewes, 1997).

يتواجد فيروس ابيضاض الدم في الأبقار في جميع أنحاء العالم مع اختلاف نسب الانتشار ومعدلات الحدوث بين المناطق الجغرافية, تراوحت نسب الانتشار بين 1-100% (Moola and Kwazulu-Natal, 2008). وفي بعض المسوحات المصلية المحدودة لمناطق في جنوب افريقيا کانت نسبة الانتشار 10% في أبقار الجيرسي بينما کانت نسبة الانتشار في عروق أبقار اللحم وخاصة السلالات المهجنة مع الأبقار المحلية أقل بکثير (Radostits et al., 2000).

سجل الباحثون Batmaz et al. (1995) في دراسة مصلية أجريت على ابيضاض الدم المستوطن في منطقة بورسا في ترکيا (Bursa Region of Turkey) في عينة مصلية مکونة من 459 رأسا بقريا مکونة من 282 رأس بقري من سلالة الهوليشتاينHolestein  و127 رأس بقري من سلالة السويسري البني Brown-Swiss و50 رأس بقري من سلالة ناتيف بوز Native Boz)) نسبة الانتشار وصلت إلى 59.15% وتعداد الحالات الإيجابية قدرت بـ 42 حالة.

في الواقع لا توجد إلا القليل من الدراسات الوبائية الکمية لابيضاض الدم المستوطن في سوريا وعلى مستوى محدود وضمن مناطق محدودة ولذلک کان لابد من إيجاد دراسات وبائية کمية مسحية واسعة الانتشار في سوريا لدراسة المرض من الناحية الوبائية الکمية والمؤشرات التشخيصية بتفاصيلها والمؤشرات الوبائية الأخرى لهذا المرض والتي لم تؤخذ بعين الاعتبار في الدراسات السابقة.

مواد وطرائق البحث

Materials and Methods

مواد البحث

أخذت عينات دم حسب ما هو مطبق في النصوص العلمية والمنصوحة من قبل مکتب الأوبئة الدولي لعام 2008   وبالطريقة العشوائية النظامية. حيث تم أخذ عينات دم بحجم (10) مل من الوريد الوداجي لکل حيوان باستخدام رؤوس إبر وبقياس 21×1.5 مم استخدام مرة واحدة, وفي أنابيب مفرغة من الهواء, وتم نقل هذه العينات إلى المخبر مع کميات من الثلج. ترکت العينات لتتجلط وتم تدوير العينات بسرعة دوران (1500 دورة/بالدقيقة) لمدة 10 دقائق للحصول على المصل. ثم تم تخزين المصل بأنابيب أبندورف مکتوب عليها أرقام الحيوانات وتاريخ جمع العينات وحفظت بدرجة التجميد العميق (-20)ºم لحين اختبارها. تم جمع 651 عينة من مزارع القطاع الحکومي التجاري موزعة على 11 مزرعة منتشرة في مختلف مناطق القطر العربي السوري ومن 279 عينة أخذت من مزارع القطاع الخاص موزعة في المنطقة الوسطى من سوريا وموزعة ضمن المناطق الريفية في کل من محافظة حماه (منطقة الغاب) وحمص (منطقة الحولة). وقد تم جمع 50 عينة دم في أنابيب دم معقمة ومفرغة من الهواء بسعة 5-10 مل ومضاف لها مانع تخثر ]  [EDTA (Produced by British company, Belliver Industrial Estate, Plymouth, code, PL67BP, UK ) من مزرعتين من مزارع القطاع التجاري بغرض الکشف عن تعداد الليمفاويات في الحيوانات التي ثبت بالاختيار المصلي إيجابيتها للمرض في کل من محافظة اللاذقية وحماه.

حيوانات الدراسة

جمعت عينات الدراسة من 11 قطيع من مزارع القطاع العام التجاري موزعة في مختلف مناطق محافظات الجمهورية العربية السورية (حماه – حمص- درعا- دمشق- حلب- دير الزور- اللاذقية- طرطوس) وقد اقتصرت الدراسة الحالية على عينات القطاع التجاري الحکومي: والتي شملت على 651 عينة دم أخذت من الأبقار الإناث في الأعمار المختلفة من عمر ستة أشهر وحتى عمر أکثر من تسع سنوات هو موضح في الجدول رقم (1). تميزت هذه القطعان بما يلي:

تعد هذه القطعان تابعة لمزارع المؤسسة العامة للمباقر في سوريا (Governmental Organization of Cattle, GOC) حيث أحدثت المؤسسة العامة للمباقر بموجب المرسوم التشريعي رقم 398 لعام 1974م بحيث تکون ذات خصائص اقتصادية من أهم استثماراتها هي تربية الأبقار ذات العروق الهجينة وتسمين العجول الوليدة بغية زيادة إنتاج الحليب واللحم بما يفي بتامين الاستهلاک المحلي بأقل التکاليف علاوة على مساعدة المربين في مجال التحسين الوراثي ونظم التلقيح الصناعي. بداية تم استيراد بکاکير من سلالة الفريزيان هولشتاين من الدنمارک وهولندا وألمانيـا (Foreign Agriculture, 1975). وقد باشرت العمل فعليا في منتصف شهر آب لعام 1974 حيث اتبعت لوزارة الزراعة والإصلاح الزراعي وهي جب رملة ودير الزور وفديو ودير الحجر والغوطة ودرعا وکيتيان والزربة. ثم أتبع لها مشروع جورين عام 1976 ومن ثم مشروع محطة حمص ومجمع مسکنة وتل تمر وأخيرا اتبع لها محطة طرطوس عام 1997 ليصبح المجموع الکلي للمشاريع التابعة للمؤسسة 11 مزرعة.

الجدول رقم 1: التوزيع التکراري المطلق لعينات الدم المستخدمة في الفحص المصلي وفصل الليمفاويات والمأخوذة من مزارع الأبقار في القطاع التجاري الحکومي.

الشکل رقم 2: التوزيع التکراري المطلق لأعداد العينات في مزارع الأبقار في القطاع التجاري الحکومي خلال فترة الدراسة.

جمع البيانات وتنظيمها:

جمعت البيانات المتعلقة بخصائص المزرعة (استبيان المزرعة) والذي يصف الخصائص الإنتاجية بما يتعلق بإنتاج الحليب ومعايير الخصوبة الإنتاجية وکذا معدلات الاستبعاد والفقد الکلي وتحرکات القطيع من مزرعة إلى أخرى مزارع القطاع الحکومي ووصف معدلات الاستبدال وخصائص التربية الإدارية والفنية والبيئية. وتناولت البيانات مجموعة أخرى من البيانات وهي تصف الخصائص الفردية لکل حيوان أخذت منها عينات الدراسة وهي تشمل اسم المزرعة (رمز المزرعة) ورقم الحيوان (الکود المستخدم لکل حيوان والمرمّز في عينات الدراسة) وتاريخ الولادة والإنتاج الموسمي من الحليب وأعداد أيام الحلابة وأعداد مرات الإجهاض والإنتاج اليومي من الحليب وتاريخ أخر ولادة والفترة بين ولادتين وهذا سمي بالدراسة بالاستبيان الفردي.

فحص البيانات وتنسيقها وتنظيمها: (Data Checking, Handling and Organization)

نسقت ونظمت البيانات خلال مرحلتين اثنتين کما يلي:

1-      فحصت البيانات للتقصي عن الأخطاء الناجمة أثناء عملية الإدخال کما يلي:

             أ‌-     قبل تحليل البيانات المحصول عليها, فإن البيانات المحصول عليها فحصت باستخدام أيقون الأخطاء في برنامج نظم المعلومات عند الأبقار الحلوب (The Dairy Information System, 1993).

           ب‌-   وفحصت البيانات ثانية باستخدام أيقون فحص الأخطاء في برنامج انترهيرد (InterHerd Program 1998).

           ج‌-   عند نقل البيانات إلى قاعدة البيانات في Access فقد عرفت کافة البيانات المفقودة بتقسيمها إلى قطعان منفصلة ضمن ثلاثة أشکال من الجداول الخلالية (سجلات الحلابة, سجلات الأمراض, سجلات مواسم الإدرار). وقد استثنيت کامل البيانات المفقودة من عملية التحليل.

2-      نقلت البيانات من برنامج نظم المعلومات عند الأبقار الحلوب (The Dairy Information System) إلى برنامج انترهيرد.

3-      ولإنجاز بعض أهداف الدراسة, فقد نقلت البيانات من برنامج انترهيرد إلى مايکروسوفت أکسـس Microsoft Access وميکروسوفت إکسل Microsoft Excel لتشکيل استعلامات queries ولإنشاء متغيرات جديدة وأخيرا نقلت البيانات من مايکروسوفت اکسل إلى البرنامج الإحصائي (Statistix ® for windows, version, 4.0, Analytical software, 2000) من أجل عملية التحليل الإحصائي.

حيث بعد نقل البيانات إلى ملفات ASCII, فقد کان بالإمکان نقلها إلى برنامج انترهيرد. ولتحقيق أغراض الدراسة فإن بعض الحسابات قد أجريت باستخدام برنامج انترهيرد, وقد نظمت البيانات ثانية باستخدام برنامج انترهيرد لنتمکن من نقلها إلى قاعدة البيانات في أکسس.وفي أکسس, فإن البيانات نظمت على شکل ثلاث جداول: جدول إنتاج الحليب اليومي, وجدول الأمراض, وجدول مواسم الإدرار.

RESULTS

طرائق العمل

تقانة المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم (إليزا):

يعد اختبار الانتشار المناعي بالآغار الهلامي: (Agar gel immuno-diffusion AGID) اختباراً مخصصً للکشف عن المستضدات  السطحية لفيروسات البروتين النشوي (glycoprotein – g p 51) حيث استخدم هذا الاختبار للکشف عن هذه بشکل شائع في جميع أنحاء العالم. إلا أن المعضلة تقع في أن حساسية اختبار الانتشار المناعي بالآغار الهلامي تعد محدودة حيث أن هناک العديد من الحالات المسجلة للعديد من الحيوانات المخموجة فشل فيها اختبار الانتشار بالآغار الهلامي للکشف عن الاستجابة المستضدة لهذا المرض .ولهذا السبب فإن اختبارات المستضدات  المسحية يتم إجراؤها الآن من خلال اختبار الأليزا أو ما يسمى (بالمقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم) والذي يعد أکثر بساطة وسرعة وفوق کل هذا أکثر حساسية.

أعداد المجموعة التشخيصية لاختبار الأليزا المستخدمة في هذه الدراسة لتحليل أو لتشخيص عينات أخذت من مصل الدم والبلازما الدموية.

المبادئ الأساسية للاختبار: Principles of the Test:

-     يمکن تلخيص المبادئ الأساسية للاختبار بالنقاط التالي:

1-      کافة الحفر المستخدمة في الاختبار مصنوعة من أطباق البولسترين (Polystyrene micro-plates) وهي مغطاة بالمستضد الفيروسي g مرض ابيضاض الدم البقري الفيروسي .

2-      تخفّف العينات المستخدمة في الاختبار إلى التراکيز من ( 1-20 ) حسب توصيات الشرکة المصنعة ولفترة تحضين قصيرة بالتخفيفات من (1-50 ) باستخدام فترة تحضين طويلة حين تحضن العينات في الحفر وأي مستضد نوعي لمرض ابيضاض الدم البقري الفيروسي يتواجد في العينة سوف يشکل مرکب مناعي لمرض ابيضاض الدم البقري الفيروسي. BLV antibody immune - Complex ويبقى مرتبطاً بهذه الحفر.

3-      بعد عملية الغسيل فإن الغلوبيوليناتالمناعيةan anti–bovine–antibody immunoglobulin  للأجسام المناعية لمسبب ابيضاض الدم عند الأبقار ، ترتبط بالأنزيم عند التحضين وهذا المقترن يرتبط بالمرکب المناعي.

4-      بعد غسيل آخر فإن أنزيم المادة الملونة السبسترات (TMB) يضاف إلى الحفر ، فإذا کان المقترن مثبت على المرکب المناعي فإن الأنزيم يحول السبسترات إلى مرکب بلون أزرق ويصبح بلون أصفر بعد إيقاف التفاعل.

-     إن کثافة التلوين تشير إلى مستوى تواجد المستضدات في العينة المفحوصة.

ترسيب أمصال العينات (Depositing The Samples)

المرحلة الأولى (1): مرحلة التحضين  (INCUBATION STAGE)

توجد طريقتين لتحضين المصل:

الطريقة الأولى:

تحضين لفترة قصيرة / 1 ساعة / ± 5 دقائق يخفّف المصل (العينات) والشواهد بترکيز / 1-20 / ويحضن لمدة ساعة واحدة بزيادة أو نقصان / ± 5 دقائق / وبدرجة حرارة / 37مْ / مع فروقات بدرجات الحرارة لا تزيد عن / 3 درجة / باستخدام الطريقة التالية:

1-      يضاف / 190/ ميکرو ليتر من محلول التخفيف رقم /2/ لکل حفرة.

2-      يضاف /10/ ميکرو ليتر من الشاهد السلبي في الحفر A1.

3-      يضاف /10/ ميکرو ليتر من الشاهد الإيجابي في الحفرة C1 , B1

4-      يضاف /10/ ميکرو ليتر من کل عينة في الحفر المخصصة للعينات.

5-      ومن أجل عملية التجانس يتم هز الطبق أو رجه بشکل هادئ ولطيف.

6-      يحضن الطبق بعد أن يغطى بورق السيلوفان ويترک في الحضانة لمدة /1 ساعة / ± 5 دقائق بالدرجة / 37مْ /

الطريقة الثانية:

1-      تحضن العينات لفترة طويلة وبدرجات حرارة منخفضة وطوال الليل لفترة تتراوح ما بين/ 16-24/ ساعة وبدرجة حرارة + 5مْ مع فروقات حرارية لا تزيد عن / 3مْ / بالزياة أو النقصان.

2-      تخفّف العينات والشواهد بالترکيز / 1-50/ باستخدام محلول التخفيف رقم /2/ المزود مع المجموعة التشخيصية، وتتم طريقة العمل کما يلي:

أ‌-        يضاف /200/ ميکروليتر من محلول الشاهد السلبي الممدد إلى الحفرة A1

ب‌-    يضاف /200/ ميکروليتر من الشاهد الإيجابي الممدد في الحفرة C1, B1

ت‌-    يضاف /200/ ميکروليتر من العينات المخفّفة في الحفر المخصصة لها.

ث‌-    يغطى طبق البوليسترين بورق من السلوفان ويترک ليحضن خلال فترة الليل بالدرجة + 5مْ حيث تجري هذه الطريقة مساءً ليتم إجراء الاختبار خلال اليوم التالي.

المرحلة الثانية (2): محلة الغسيل (WASHING STAGE)

-     يخفف /20 مل/ من محلول الغسيل المرکز في /1900/ مليتر من الماء المقطر.

-     يفرغ محتوى الطبق بشکل يدوي أو يمکن استخدام طريقة الغسل الآلي باستخدام جهاز الغسيل.

-     تملأ کامل حفر الطبق بمحلول غسيل ممدد ومن ثم يفرغ ثانية.

-     يعاد الغسيل مرتين أو ثلاثة حسب ما ذکر أعلاه.

المرحلة الثالثة (3): مرحلة الاقتران (DEPOSITING THE CONJUGATE)

-     يخفف محلول الاقتران بترکيز 1/100 باستخدام المحلول المنظم رقم /1/.

-     تضاف /100/ ميکروليتر من محلول الاقتران في کل حفرة کدارئ مخفف (Dilution buffer).

-     يغطى الطبق بالسلوفان ويترک للتحضين لمدة /30/ دقيقة ±3 دقائق وبدرجة (37مْ )( ±3 درجات ).  

المرحلة الرابعة (4): مرحلة الغسيل (WASHING)

-     تعاد المرحلة الثانية.

المرحلة الخامسة (5): مرحلة التلوين(REVELATION)

-     يضاف /100/ ميکروليتر من محلول التلوين الجاهز للاستخدام لکل حفرة.

-     يحضن الطبق لمدة /20/ دقيقة بالدرجة /21مْ/ ±5 درجة على أن يترک بعيداً عن الضوء أو أي مصدر ضوئي بعد أن يغطى بالسلوفان.

المرحلة السادسة (6): مرحلة إيقاف التفاعل (STOP SOLUTION)

-     يضاف /100/ ميکروليتر من محلول التوقف لکل حفرة.

-     يتم هز (رج) الطبق بشکل لطيف حتى حدوث التلوين بشکل متجانس وتمسح بحذر المحاليل الطافية على جوانب الطبق.

المرحلة السابعة (7): القراءة (READNG)

-     يتم قراءة الکثافات الضوئية بموجات ذات طول /450/ nm. نانو ميتر وباستخدام جهاز الطيف الضوئي والذي يجب أن يکون خالياً من الهواء.

معايير صلاحية الاختبار: (VALIDATION CRITERIA)

يمکن أن تعاد النتائج ذات صلاحية في الحالات التالية:

1-      إذا کان متوسط الشاهد الإيجابي ذو قيمة لا تقل عن (0.350).

2-      إذا کان التناسب متوسط قيمة الشاهد الإيجابي والشاهد السلبي ≥ القيمة 3

الشکل رقم (7) مراحل مختلفة من إجراءات اختبار تقنية الاليزا

تفسير النتائج

 INTERPRETATION

-     تحسب النسبة S/P لکل عينة کما يلي:

%=100 x ( OD450 value of the sample – od450 value of the negative  control

قيمة الشاهد السلبي من 450ک ب – قيمة العينة 450ک ب * 100=%

-  450 value of the mean posit1 positive control

450ک ب  من متوسط  قيمة المقرونات المرسبة للشاهد الإيجابي

-  450 value of the mean posit1 negative control

450ک ب  من متوسط  قيمة المقرونات المرسبة للشاهد السلبي

1-      إذا کانت قيمة S/P للعينات المفحوصة ≤ 85% فتعد الحيوانات المفحوصة خالية من فيروس ابيضاض الدم.

2-      إذا کانت قيمة S/P للعينات المفحوصة تتراوح بين المجال (85%- 115) فتعد الحيوانات المفحوصة مشتبهة بإصابتها بفيروس ابيضاض الدم.

3-      إذا کانت قيمة S/P للعينات المفحوصة ≥ القيمة 115% يؤخذ بعين الاعتبار أن هناک حالة إيجابية واحدة على الأقل في القطيع المأخوذ منه العينات. 

قياس تکرار مستوى حدوث المرض في الأبقار

الأعراض السريرية المشاهدة

تمثلت الأعراض المشاهدة بحدوث انخفاض في الوزن وانخفاض شديد في إنتاج الحليب اليومي دون ملاحظة أية تغيرات فيزيائية على مظهر الحليب المنتج. ولوحظ تضخم في الغدد الليمفاوية عند بعض الحيوانات المشتبه بإصابتها (والتي کانت تشخص على أنها إصابة بطفيليات دموية مثل الثاليريا). بالإضافة إلى ارتفاع في درجة الحرارة عند العديد من الحيوانات التي أخذت منها العينات لم تلاحظ أية حالات شلل في القوائم الخلفية کما أدرجته العديد من المراجع البحثية. ولوحظ في متابعة السجلات للحيوانات الإيجابية وجود انخفاض في الخصوبة تمثلت من خلال انخفاض نسب الولادات من خلال معايير عدة کزيادة الفترة بين ولادتين وزيادة الفترة الفاصلة ما بين عملية التلقيح وتحديد موعد الإخصاب الإيجابي کما وکان هناک فشل في عملية الإخصاب لعدة مرات للحصول على حالة إخصاب إيجابية واحدة.

 الانتشار المصلي باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنظيم

أظهر نتائج اختبار الاليزا أن نسبة الانتشار المصلي العام في مزارع القطاع العام 31.12% وقد سجلت الحالات الإيجابية في أربعة مزارع مرمزة بالأرقام 2-5-9-10 وموزعة في مناطق حماه وطرطوس واللاذقية ودمشق بينما کان الانتشار المصلي العام في مزارع القطاع الخاص (المنطقة الوسطى) 15% حيث سجلت الحالات الإيجابية فقط في مناطق ريف حماه بينما لم تسجل أية حالة إيجابية في مناطق ريف حمص کما هو موضح في الجدول رقم (2).

الجدول رقم 2: الانتشار المصلي لابيضاض الدم في مزارع الأبقار في القطاع الحکومي التجاري

علاقة الانتشار المصلي لابيضاض الدم مع العمر الانتاجي في مزارع أبقار القطاع العام:

يوضح الجدول رقم (3) و (4) و (5) و (6) و (7) و (8) علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي لأبقار مزارع القطاع العام المشمولة في الدراسة.

الجدول رقم 3: علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي (الموسم الإداري الأول) لأبقار مزارع القطاع العام الموبؤة والمشمولة في الدراسة.

الجدول رقم 4: علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي (الموسم الإدراري الثاني) لأبقار مزارع القطاع العام الموبؤة والمشمولة في الدراسة.

الجدول رقم 5: علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي (الموسم الإدراري الثالث) لأبقار مزارع القطاع العام الموبؤة والمشمولة في الدراسة.

الجدول رقم 6: علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي (الموسم الإدراري الرابع) لأبقار مزارع القطاع العام الموبؤة والمشمولة في الدراسة.

الجدول رقم 7 : علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي (الموسم الإدراري الخامس) لأبقار مزارع القطاع العام الموبؤة والمشمولة في الدراسة.

الجدول رقم 8: علاقة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم مع العمر الإنتاجي (الموسم الإدراري الخامس وما فوق) لأبقار مزارع القطاع العام الموبؤة والمشمولة في الدراسة.

دراسة عوامل الخطورة المرافقة لمرض ابيضاض الدم المستوطن عند الأبقار

- نتائج نموذج الانحدار اللوغاريتمي لحدوث ابيضاض الدم المستوطن عند الأبقار

تـم إجراء دراسـة الانـحدار اللوغاريتمي من خـلال ما يعـرف بالدراسة التحليلية المرحلية المتدرجة ((Stepwise Analysis وذلک من خلال استخدام اختبار G الإحصائي والجدول (9) يوضح نتائج الانحدار اللوغاريتمي المتعدد لتأثير عوامل الخطورة على حدوث ابيضاض الدم المستوطن عند الأبقار.

الجدول رقم 9: نتائج الانحدار اللوغارتمي المتعدد لتأثير عوامل الخطورة الکامنة على انتشار ابيضاض الدم المستوطن عند الأبقار في سوريا:

المرحلة الأولى

المرحلة الثانية

المرحلة الثالثة – جدول النموذج النهائي

الجدول رقم 10:  قيم P  الاحتمالية اعتمادا على اختبارG  الإحصائية

أظهرت نتائج الانحدار اللغارتيمي لقياس ترافق بعض عوامل الخطورة مع مرض ابيضاض الدم المستوطن أن عامل العمر الإنتاجي دون الموسم الإدراري الثالث أکثر ترافقا لحدوث المرض وسجلت ترافق حالات المرض في فصل الصيف أکثر منها من فصل الشتاء وهذا يعود إلى انتشار الحشرات الطائرة في فصل الصيف بشکل أکبر منه في فصل الشتاء کما أن عامل الازدحام قد ساهم بشکل کبير في نقل الخمج بشکل مباشر أو غير مباشر إلى القطيع.

DISCUSSION

المناقشة والاستنتاجات

تعتبر هذه الدراسة من الدراسات القليلة في سوريا في مجال الدراسات الوبائية المتعلقة بتقييم الوضع الوبائي الکمي لمرض ابيضاض الدم المستوطن في کل من مزارع القطاع العام والخاص.

تراوح الانتشار المصلي لمرض ابيضاض الدم المستوطن باستخدام تقنية الامتصاص المناعي المرتبط بالأنزيم في مزارع القطاع الحکومي ما بين 22% إلى 74.19% حيث سجلت الحالات الإيجابية للمرض في خمس مزارع من مزارع القطاع الحکومي وسجلت ستة مزارع منها خلوها من الحالات الإيجابية للمرض.و سجل انتشار عام لمرض ابيضاض الدم المستوطن في مزارع القطاع الحکومي بمعدل 31.12% .

وبالمقارنة سجلت الدراسة انتشار عام للمرض باستخدام نفس التقنية عند أبقار مربي القطاع الخاص 15% حيث سجلت عدد مطلق من الحالات الإيجابية 42 حالة إيجابية من أصل 279 عينة وبنسبة انتشار 23.46% سجلت جميعها في مناطق ريف حماه ولم تسجل أية حالة إيجابية من العينات المجموعة من مناطق ريف حمص.

وباستخدام تقنية الانتشار المناعي بالآجار الهلامي في عينات القطاع الخاص فقد سجلت الدراسة 22% في مناطق ريف حماه هو بانتشار عام 13.90 %

إن الاختلافات في انتشار المرض بين المناطق السورية, وبين سورية ومناطق أخرى من العالم يمکن أن تفسر بعوامل خطورة مختلفة کزيادة حجم القطيع, واختلاف تطبيق مفاهيم إجراءات التحکم بالمرض, وغيرها من عوامل الخطورة التي تساهم بشکل أو بأخر بانتشار المرض ضمن القطيع الواحد أو من رأس بقري إلى أخر.

وتطابقت نتائج الدراسة الحالية في بعض مناطق الدراسة مع الدراسة التي أجريت في عام 1998 في سوريا ارتفاعا في مستوى المستضدات النوعية لحمة ابيضاض الدم عند الأبقار الحلوب في محطة فيديو المناطق المجاورة لها حيث وصل الانتشار المصلي في محطة فيديو باستخدام اختبار الانتشار المناعي إلى 54.54% بينما لم تسجل أية حالة انتشار مصلي إيجابي في المناطق المجاورة للمحطة المذکورة مع العلم أن تعداد العينات المختبرة في محطة فيديو کان يقدر بـ 286 عينة بينما کان تعداد العينات في القطاع الخاص (المناطق المجاورة للمحطة) 69 عينة وهذا ما يعزى تفسير عدم تسجيل أية حالة إيجابية في هذا المناطق نظر لصغر حجم العينة المختبرة في مناطق القطاع الخاص (کرديو فاضل, 1998) وهذا يطابق بشکل قريب انتشار المرض التي سجلته الدراسة الحالية في بعض مزارع الدراسة.

وسجلت الدراسة الحالية ارتفاعا بالحالات المصلية الإيجابية مقارنة مع دول الجوار. حيث سجلت دراسة عام 1995 بمنطقـة برسا بترکيـا (Bursa region) في دراسة أجريت على 459 بقرة نسبة انتشـار مصلي 9.15% (Batmaz et al., 1995), وفي دراسة أخرى مشابهة في ترکيا أجريت على 77 مزرعة في منطقة مارمارا (Marmara region) سجلت نسب انتشار 11% (Uysal et al., 1998).

بينما تطابق الانتشار المصلي للمرض مع بعض الدراسات التي أجريت في مناطق الجوار حيث سجلت دراسة أجريت عام 1999 في ترکيا نسب انتشار تراوحت بين القيم 9.62- 43.4% (Batmaz et al., 1999).

سجلت الدراسة ترافق الحالات الإيجابية في المواسم الإدرارية الثلاثة الأولى من العمر الإنتاجي حيث تراوح الانتشار المصلي في الموسم الإدراري الأول ما بين 10.34% إلى 24.73% وفي الموسم الإدراري الثاني من 2% إلى 31.12% وفي الموسم الإدراري الثالث من 2% إلى 25.71%.و في الموسم الإدراري الرابع تراوح الانتشار ما بين 2% إلى 13.79%, وفي الموسم الإدراري الخامس من 1% إلى 5%, بينما سجل انتشار مصلي للحالات الإيجابية ما بين القيمة 0% إلى 2% في الموسم الإدراري الخامس فما فوق.

لم تسجل الدراسة الحالية أية ترافق معنوي بين الحالات الإيجابية المسجلة وترافق بعض عوامل الخطورة الکامنة کالعرق والجنس والعمر وهذا ما تطابق مع دراسات أخرى سابقة (Uysal et al., 1998).

ويمکن أن نقدم استنتاجاتنا في هذه الدراسة من خلال وجود ارتفاع في الانتشار المصلي عند کافة الحيوانات البالغة جنسيا وفي کافة الأعمار في کل منطقة من مناطق الدراسة وهذا يعود إلى عدم وجود تحصين في أي منطقة من مناطق القطر ضد هذا المرض وبکافة الأعمار ولذلک يجب الاهتمام بإجراءات الأمن الحيوي. مما يحتم اقتراح إيجاد استراتيجيات للتحکم والوقاية من حدوث هذا المرض بشکل وبائي والعمل على استئصالها في المناطق التي يستوطن فيها هذا المرض.

REFERENCES

المراجـع

Analytical Software, (2000): Statistix, version 4.0. Windows Version. United State of America.

Batmaz, H.; Caril, K.T.; Sen, A. and Kennerman, E. (1999): Güney Marmara Bȍlgesinde Enzootik Bovine Leukosis in Prevalansi Ve Bazi Bakim-Yetistirme Kosullarinin Incelenmesi. Tr. J. of Veterinary and Animal Science, 2: 261-268.

Batmaz, H.; Carli, K.T.; Kahraman, M.; Cetin, C. and Kennerman, E. (1995): Serological and Haematological Diagnosis of Enzootic Bovine Leukosis in Cattle in Turkey. Vet. Rec. 136: (2): 42-4.

Brenner, J.; Ungar-Waron, H. and Trainin, Z. (2002): Bovine Leukaemia Virus Sero-Prevalence in Large Holestian Dairy Herds. American Journal of Veterinary Medicine, 57 (1) 3-5.

Coffin, J.M. (1990): Retroviridae. In R. I. B. FRANCKI, C. M. FAUQUET.

Dairy Information System Software (1993): Manual Guide. Faculty of Food and Agricultural, University of Reading, UK.

Fechner, H. (1995): Diagnostik der enzootischen Rinder Leukose mit serologischen und virologischen nachchweis verfahren unter besonderer berueckschit igung der polymerase ketteneraktion (PCR) untersuchungen zum Aufterten von provirusmutan ten des bovinen leukosevirus (BLV). Diss. Freie Universitaet of Nbraska, USA.

InterHerdProgram Software (1998): Manual Guide. Pan Livestock Company Limited, Early Gate, Reading, UK.

Iyisan, A.S.; Bitgel, A. and Ozyoruk, F. (1997): Serological Survey of the Prevalence of Bovine Leucosis in Dairy Cows in IstanbulProvince. Pendik Veterinary Mikobiyoloji Dergist, 27 (2): 223-245.

Kurdi, A. and Fadel, M. (1998): Study on the Presence of Enzootic Bovine Leukosis Virus-Specific Antibodies by Using Immunodiffusion Test. Al-Baath University Press Journal., Vol. 20, pp129-140.

Mewes, G. (1997): Langzeitstudie zur persistenz des bovine Leukosevirus (BLV) in entire Leukoseanierten milchviehherde. Diss Freie Univresitaet Berlin.

Moola, M.H.A. and Kwazulu–Natal, (2008): Seroprevalence of Bovine Leukemia Virus (BLV) Infection in Dairy Cattle in Selected District of Kwazulu-Natal Following The Diagnosis of Enzootic Bovine Leukosis in a Dairy Cattle Herd. Allerton Provincial Laboratory, Pietermaritzburg.

"OIE" Office International DE Epizooties (2000): Manual of Standard Diagnostic Tests and Vaccines, Bovine Leukosis, France.

"OIE" Office International of DE Epizooties (2008): Terrestrial Manual, Annual Test Book on 2008.

Radostits, O.; Gray, C.C.; Blood, D.C.; Hinchcliff, K.W. and Sounders, W.B. (2000): Veterinary Medicine: A textbook of the Diseases of Cattle, Sheep, Pigs, Goats and Horses. 9^th ed. UK.

Uysal, A.; Yilmaz, H.; Bilal, T.; Berriatua, E.; Bakirel, U.; Arslan, M.; Zerin, M. and Tan, H. (1998): Seroprevalence of Enzootic Bovine Leukosis in Trakya District (Marmara region) in Turkey. Prev. Vet. Med., 1; 37 (1-4): 121-8.