PREVEALENCE OF INFECTIOUS BOVINE RHINOTRACHITIS VIRUS ANTIBODIES IN BOVINE SERUM IN MOSUL, IRAQ

PREVEALENCE OF INFECTIOUS BOVINE RHINOTRACHITIS VIRUS ANTIBODIES IN BOVINE SERUM IN MOSUL, IRAQ

M.SH. RHAYMAH, S.A. ESMAEEL, S.D. HASSAN and KH.J. HUSSAIN

Department of Internal and PreventiveMedicineCollege of Veterinary Medicine, University of Mosul , Mosul ,  Iraq

__________________________________________________________________________________________

                                              ABSTRACT

_________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________

                                             Key words:   IELISA ,IBR , Prevalence , Cattle , Mosul

__________________________________________________________________________________________

نسب انتشار أضداد حمة التهاب الانف والرغامى المعدي (الخمجي)في مصول الأبقار في الموصل، العراق.

ماجد شيال رحيمه ,  سلام عبد إسماعيل , صدام ظاهر حسن ، خضر جاسم حسين

تمثلت العلامات السريرية التي ظهرت على الابقار المصابة بالتهاب الانف والرغامي الخمجي في الابقار بارتفاع درجة الحرارة والتهاب القرنية وملتحمة العين وافات تقرحية على المخطم والحاجز الانفي مع سيلان اللعاب وتدمع العينين مع افات على القلفة في الذکور وبثرات على الغشاء المخاطي على المهبل والفرج في الاناث. کان معدل تواجد اضداد حمة التهاب الانـف والرغامـي الخمجي في مصول دم الابقار باستخدام اختبار الاليزا غير المباشر 67.4 % في العجول التي اظهرت علامات تنفسية مع وجود افات على الجهاز التناسلي ،وبنسبة 72.7% في الابقار المجهضة و 62.5% في الابقار التي اظهرت التهاب القرنية وملتحمة العين. تراوحت معاير الاضداد في العجول التي اظهرت علامات تنفسية مع افات على الحشفة والقلفة بين 1.414± 0.15 في الحالات البسيطة الى 2.34±0.06 في الحالات الشديدة اما في الابقار المجهضة فتراوح معدل معاير الاضداد بين 4.67± 1.44 الى 125.53 ±8.68 اما في التهاب القرنية وملتحمة العين في الابقار فتراوح معدل معاير الاضداد بين 65.9±15.96 الى 121.26 ±2.66 في الحالات البسيطة والشديدة على التوالي.

INTRODUCTION

المقدمة

           تعد حمة الهربس  البقري نوع (BHV-1) Alpha herpes virus المسبب المرضي الرئيس في الابقار على الصعيد العالمي ويسبب التهاب الانف والرغامى الخمجي في الابقار (IBR) Rhinotrachitis Infectious Bovine  وخمج الفرج والمهبل البثري (IPV) Infectious pustular vulvovaginitis  والتي تشمل مدى واسع من العلامات السريرية في الماشية (Banenfus et al., 1963) ويتمييز المرض باصابة اعضاء الجهاز التنفسي العلوي مسبباً علامات سريرية مثل الافرازات الانفية واحتقان المخطم لذلک يسمى المرض (Red nose disease) , والتهاب ملتحمة العين  Conjunctivitis, وحمى , واکتأب Depression وفقدان الشهية والاجهاض , وقلة انتاج الحليب , کما يمکن للحمـة اصابـة المسالک التناسليـة مسببة  التهاب الفرج والمهبل البثـري في الاناث والتهاب الحشفـة والقلفة في الذکر Balanoposthitis  (OIE 2010;  Parsomson and Swowdow, 1975; Radostitis et al., 2007)  فترة الحضانة للمرض (2-4) يوماً يليها افرازات انفية ودمعية مخاطية ,مع سيلان اللعاب ,وبعد ايام عديدة تصبح الافرازات الانفية والدمعية مخاطانية قيحية (Miller,1991) .

تصيب الحمة الماشية الداجنة  فضلاً عن اصابتها الانواع الأخرى من ثنائية الظلف مثل الأغنام , والمعز والجاموس (Biuk-Rud an et al., 1999) تتکاثر الحمـة بشکل أولي فـي مخاطيـة الجهاز التنفسي أو المجاري التناسليـة ويمکن إن يحـدث إصابـة کامنـة لمـدة طويلـة في العقـد العصبيـة في الجهـاز العصبـي المحيطـي (Van Engelemburrg et al., 1993). يحدث الإجهاض عادة في الثلث الأخير من الحمل کما يمکن للحمة ان تسبب قلة الخصوبة وقصر فترة دورة الشبق في الأبقار غير الحوامل , کما وتسبب الحمة التهاب بطانة الرحم ألنخري  والتهاب المبايض وآفات شديدة في الجسم الأصفر Corpus Winkler et al., 2000; Murphy et al., 1999)).

يحدث المرض عادة بشکل التهاب الجهاز التنفسي تحت ألسريري ثم يتحول الى الشکل الحاد وتصل نسبة الاصابة ونسب الهلاک من 10% الى 100% ، وتزيد من شدة المرض الالتهابات البکتيرية الثانوية مثل الاصابة بجراثيم الباستيرلا (Radostitis et al., 2007). يمکن تشخيص الحمـة من خلال التحري عن الأضداد الخاصة بحمـة BHV-1 والتي يمکن الکشف  عنها خلال فترة 7- 10 أيام من بداية الاصابة وکذلک خلال الطور الکامن للحمة ومن استخدام الاختبارات المصلية منها اختبار تعادل الحمةViral Neutralazationt test  واختبار الاليـزا والتي يعتمد عليهما کثيرا في التحري والکشف عن أضداد هذه الحمة ( Nardelli et al., 2008; Van Oirscha, 2000; Pierre et.al., 1979)   

ونظرا لعدم وجود دراسة مسبقة في مدينة الموصل اجريت هذه الدراسة للتحري عن تواجد الاضداد الخاصة بحمة الهربس البقري نوع   BHV-1   باستخدام تقنية الاليزا غير مباشر على عينات المصل في الابقار والتي أظهرت علامات سريرية للمرض.

MATERIALS and METHODS

المواد وطرائق العمل

حيوانات الدراسة:-

أجريت الدراسة على قطيع من العجول تراوحت أعمارها بين ثمانية شهور إلى سنة تربى لغرض التسمين في منطقة کوکجلي التابعة لمدينة الموصل ، العراق والتي کانت تعاني من علامات تنفسية وافات في الجهاز التناسلي شخصت سريرياً على أنها التهاب الانف والرغامى المعدي، أخذت منها 46عينة من الدم لغرض فصل المصل ومن ثم إخضاعها الى اختبار الاليزا غير المباشر للتأکد من تشخيص المرض. کما تم سحب 24عينة من الدم من الأبقار کانت تعاني من حالات التهاب القرنية وملتحمة العين في المنطقة نفسها، فضلاً عن سحب 22عينة من الدم الأبقار  مجهضة وردت إلى المستشفى التعليمي البيطري التابع لکلية الطب البيطري جامعة الموصل في الفترة من تشرين الثاني 2011 إلى آذار 2012.

الاختبارات المصلية:-

تم إخضاع عينات المصل إلى اختبار الاليزا غير المباشر بعد جمع عينات الدم بواسطة سحبه من الوريد الوداجي وتم وضعه في أنابيب اختبار زجاجية سعة 10 مل معقمة ترکت لمدة 24 ساعة في الثلاجة ثم فصل المصل باستخدام جهاز الطرد المرکزي بسرعة 3000 دورة / دقيقة  لمدة 3 دقائق بعد ذلک سحب المصل ووضع في أنابيب صغيرة ذات سدادات محکمة ووضع في درجـة -20م◦ لحيـن إجراء الاختبـار. تـم تاًميـن عـدة الاليزا من شرکـةBiox diagnostics  البلجيکية واجري الاختبار حسب تعليمات الشرکة وکما يلي:

1-       تم إجراء الاختبار في مختبر التشخيصات المرکزي في کلية الطب البيطري/ جامعة الموصل في درجة حرارة 25C◦.

2-       تحضير محلول الدارئ المخفف (D.B) 5X Dilution buffer

3-       إضافة 10 مايکروليتر من عينات المصل المراد اختيارها وکذلک عينات السيطرة الموجبة والسالبة الخاصة بعدة الاليزا إلى أنابيب اختبار زجاجية تحتوي على 1مليليتر من محلول الدارئ المخفف.

4-       إضافة 100ماکروليتر من عينات المصل المخففة لکل حفرتين متجاورتين مثلاً (A1-A2,B1-B2) في الطبق الخاص بعدة الاليزا وبعد ذلک تم الحضن لمدة ساعة واحدة وبدرجة حرارة 25C◦.

5-       غسل الطبق بواسطة محلول الغسل Washing solution اربعة مرات ومع کل عملية غسل يجفف الطبق على المناديل الورقية.

6-       إضافة 100ماکروليتر من محلول الاقتران Conjugated solution لکل حفرة وإعادة الحضن لمدة ساعة واحدة وبدرجة حرارة 25C◦.

7-       إعادة الغسل کما في الخطوة رقم 5

8-       إضافة 100 ماکروليتر من المحلول الملون Chromagen solution لکل حفرة من حفر الطبق وتحضن لمدة 10 دقائق مع تغطية الطبق بغطاء لمنع وصول الضوء.

9-       يضاف 50 مايکروليتر من محلول موقف التفاعلStop solution  لکل حفرة في الطبق.

10- تقاس الکثافة الضوئية Optical density  باستخدام جهاز قارئ الأطباق Plate reader  وبطول موجي 450  نانوميتر بعد إضافة محلول موقف التفاعل.

11- قراءة النتائج واستخراج نسبة تواجد معايير الاضداد لکل عينة بعد استخراج معدل کل حفرتين متجاورتين (A1-A2=S1) وحسب المعادلة التالية:

Val=delta OD Sample×100/delta OD positive

RESULTS

النتائج

تمثلت العلامات السريرية التي ظهرت على الحيوانات  التي خضعت مصولها الى اختبار الاليزا غير المباشر للتقصي عن اضداد حمة التهاب الرغامى المعدي (الخمجي) بارتفاع درجة حرارة الجسم بنسبة (28%) والتهاب القرنية وملتحمة العين بنسبة (23.8%) وافات تواجدت على المخطم والفم بنسبة (21%) وسيلان اللعاب بنسبة (11.25) وتدمع العينين مع افرازات انفية بنسبة (23.8%) صورة(1) مع افات على الحشفة والقلفة للعجول المصابة بنسبة (2.8%) صورة (2) وافات مهبلية (0.7%) صورة (3) وعلامات تنفسية بنسبة (28%) وأخيراً فقدان الشهية بنسبة (14.7%)  جدول (4).

کانت عينات المصل المؤخوذة من عجول ظهرت عليها علامات تنفسية والتهاب الحشفة والقلفة 46 اظهرت 15عينة منها نتائج سلبية لاختبار الاليزا غير المباشر وبمعدل معيار أضداد (0.144±0.0280) اما عدد عينات المصل التي اظهرت نتائج موجبة فکانت 31 عينة توزعت على 10 عينات صنفت اصابات بسيطة حيث کان معدل معيار الاضداد في مصولها (1.414±0.15) و8 عينات صنفت اصابات متوسطة حيث کان معدل معيار الاضداد في مصولها (1.822±0.06) واخيراً 13 عينة کانت اصابات شديدة وکان معدل معيار الاضداد في مصول دمائها  (2.339±0.0556) وکانت النسبة المئوية لتواجد اضداد  حمة التهاب الرغامى المعدي في مصول عينات العجول التي خضعت للاختبار هي 67.4% أي ظهور 31 عينة موجبة من مجموع 46 عينة خضعت للاختبار في حين کانت النسبة المئوية للعينات التي اظهرت نتائج سالبة للاختبار على الرغم من ظهور علامات سريرية على الحيوانات هي 32.60% أي ظهور 15 عينة سالبة من مجموع 46 عينة (جدول 1،2).

کانت النسبة المئوية لانتشار حمة التهاب الرغامى المعدي في الأبقار 67.4% أي ظهور 31 عينة موجبة من مجموع 46 عينة خضعت للاختبار توزعت على 72.7% أبقار مجهضة أي ظهور 16 حالة موجبة للاختبار من العدد الکلي للعينات المفحوصة وبنسبه 62.5% ابقار اظهرت علامات التهاب القرنية وملتحمة العين بينما کانت العينات السالبة  للاختبار للمجموعتين (ابقار مجهضة وابقار عانت من التهاب القرنية وملتحمة العين) بنسبة 32.60% توزعت على ابقار مجهضة اعطت نتائج سالبة للاختبار بنسبة 13.04% وابقار اظهرت علامات التهاب القرنية وملتحمة العين واعطت نتائج سالبة لاختبار بنسبة 19.56% جدول (1،3). وعند قياس معدل معيار الاضداد في مصول دماء الابقار  المجهضة التي خضعت للاختبار کان معدلها في العينات السالبة (4.667±1.441) بينما کان معدل الاضداد في مصول الابقار المجهضة التي اعطت نتائج ايجابية للاختبار هي کالآتي ( 60.486  ± 7.651 ) و ( 84.967  ± 6.5898) و(125.533 ± 8.677) في الحالات البسيطة والمتوسطة والشديدة على التوالي جدول (3) اما في مصول دم الابقار التي کانت تعاني من علامات التهاب القرنية وملتحمة العين فکان معيار الاضداد في العينات السالبة (3.200 ± 0.799) بينما العينات التي أظهرت نتائج ايجابية للاختبار فکان معدل الاضداد في مصولها هي (65.900±15.959 ) و(99.340 ± 4.885 ) و(121.257±2.662) في الحالات البسيطة والمتوسطة والشديدة على التوالي جدول(3)

جدول 1: يبين النسب المئوية لتواجد الأضداد في حالات التهاب الرغامى المعدي في الأبقار

جدول 2: يبين نسب انتشار أضداد حمه التهاب الرغامى المعدي في عجول التسمين(46عينة)

    الأرقام بين الأقواس تمثل المعدل ± الخطأ القياسي (لمعايير الاضداد)

جدول 3: يبين نسب انتشار اضداد حمه التهاب الرغامى المعدي في الابقار التي تعاني من الاجهاض والتهاب الملتحمة وقرنية العين.

     الأرقام بين الأقواس تمثل المعدل ± الخطأ القياسي (لمعايير الأضداد)

جدول 4: العلامات السريرية ونسب تکرارها في العجول الأبقار  الخمجة بحمة  التهاب الرغامى الخمجي

                                صورة 1: يبين وجود آفات على الفم والمخطم وسيلان اللعاب وتدمع

المناقشة

DISCUSSION

                                         صورة 3: يبين وجود آفات تقرحية على المهبل

تمثلت العلامات السريرية الملاحظة على الحيوانات المصابة بالحمى ، والاکتأب ، وفقدان الشهية ، وسيلان اللعاب ، وافات تقرحية في الفم والحاجز الانفي والتدمع والتهاب الملتحمة والتهاب الحشفة والقلفة في العجول حيث اتفقت هذه النتائج مع  ما لاحظه (Meyer et al., 2001)  الذي اشار إلى ان الإصابة التجريبية بحمة الهربس البقري نوع  BHV-1 في العجول اظهرت العلامات السريرية الخاصة باللتهاب الانف والرغامى ابتداءاً من اليوم الاول  والى اليوم الخامس عشر ارتفاع في درجة حرارة الجسم تصل (40.5 م) ابتداءاً من اليوم الثاني واستمرت الى اليوم السابع مع افرازات انفية تحولت الى مخاطية قيحية ، وعطاس ، والتهاب الملتحمة وافات  تقرحية في مخاطية الانف، وفقدان الشهيـة ، والسعـال وتوسع الانف ولم يسجل اية  نسبة  للهلاکات في العجـول قيد التجربة ، واشار (Ackermann and Engles, 2006) إلى إن الاصابة بالتهاب الانف والرغامى الخمجي المسبب بحمة الهربس البقري BHV-1 تعد واحدة من المسببات المرضية الهامة ذات التاثير الاقتصادي الهام على الرغم من قلة نسبة الهلاکات الا انها تسبب التهاب الجهاز التنفسي العلوي ، وافرازات انفية ، والتهاب الملتحمة ، والحمى والاکتئاب وفقدان الشهية ، وسيلان اللعاب مع قلة في انتاج الحليب ، کما اشار (Aboelzein et al., 2008) خلال حدوث ثورة مرضية في المملکة العربية السعودية في قطيع من الماشية الى ان العلامات السريرية  تميزت بالحمى وتدمع العينين وسيلان اللعاب وافرازات الانف ، وفي السودان اشار (Eisa, 1983) ان الحمة المسببة  للــIBR  شخصت في عجل يعاني من التهاب حاد في الجهاز التنفسي واظهر علامات الحمى وافرازات انفية مائية شديدة واختلاجات  تنفسية ، کما اشارا (Nardelli et al., 2008 ; Engles and Ackermann, 1996) الى ان  التهاب الانف والرغامى الخمجي مرض معدي جداً ويسبب خسائر اقتصادية معنوية في قطعان الحيوانات ، بينما اوضح (Ackermann and Engles , 2006) ان الاصابة الاولية بحمة الهربس البقري تصاحبه علامات سريرية تتضمن التهاب الانف والرغامى ، والاجهاض، والتهاب الفرج والمهبـل التقرحي واصابـات  جهازية  في الحيوانات الصغيرة ،  يحدث الاجهـاض في الابقـار بشکل متزامـن مع اصابـة الجهاز التنفسي ، وقد لاحظ (Muylkens et al., 2007  ) ان الاجهاض يمکن ان يحدث ابتداءاً من الشهر الرابع الى الشهر الثامن من الحمل في الاصابة الطبيعية وقد لاحظها في الشهر الثالث عند الاصابة التجريبية. بينما اکد (OIE, 2010) ان الاصابة تحدث عن طريق الهواء الملوث  Airborn route يعقبها تکاثر  BVH-1وبتراکيز عالية في الاغشية المخاطية للجهاز التنفسي العلوي واللوزتين ومن ثم تموضع الحمة في الملتحمة وعن طريقها يمکن ان  تعبر الى العقد الثالوثية Trigeminal gangilia عن طريق العصب المحوري ، وبعد اصابة الجهاز التنفسي تتکاثر الحمة في مخاطية المهبل او الحشفة وتصبح بشکل کامن في العقد العصبية العجزية Sacral gangilia.

التهاب الملتحمة والقرنية کانت من بين العلامات الرئيسية المشاهدة على الحيوانات التي خضعت للدراسة والتي تميزت باحتقان العينين  والتدمع في احدى او کلتا العيينين مع افرازات قيحية ، والخوف من الضوء والالم والعتامـة وهذا يتفق مع ما ذکر من قبـل ( Gazy et al., 2007 ) الذي بين ان من بين العلامات السريرية الکثيرة لالتهاب الانف والرغامى الخمجي هي التهاب الملتحمة.

 أظهرت الدراسة ان نسبة تواجد أضداد حمة الهربس البقري نوع BVH-1 في قطيع العجول (46) راساً بلغت (67.4%) في 31 عجل وبمعدل معيار للاضداد في العينات الموجبة المرضية بلغت (33.3%) باستخدام اختبار الاليزا غير المباشر ، وعند إجراء الاختبار نفسه على (24) حالة مرضية اظهرت العلامات السريرية الخاصة بالتهاب الملتحمة والقرنية کانت نسبة تواجد الاضداد (62.5%) وبمعدل (33.3%)، کما بلغت نسبة تواجد اضداد الحمة في امصال (22) بقرة مجهضة (72.7%) في 16 عينة موجبة وبمعدل معيار (33.3%) بالاختبار نفسه حيث اشار (Pierre et al., 1979) الى ان اختبار الاليزا غير المباشر من الاختبارات التي ينصح باستخدامها بالکشف عن اضداد حمة الهربس البقري ، واشار (Hashemi et al., 2009 ) من خلال الدراسة التي استخدم فيها الاختبار على عينات المصل الى ان الحمة تعد من المسببات الهامة لخمج الجهاز التناسلي في الجاموس باستخدام الاليزا غير المباشر للکشف عن اضداد  حمة الاسهال الحموي البقري وحمة الهربس البقري، حيث لاحظ  نسبة اضداد حمة الــ IBR (43.3%) في المصل مقارنة مع الحليب حيث بلغت (78.2%). مشيراً الى ان اختبار الاليزا غير المباشر فعال وحساس في الکشف عن مسببات خمجات الجهاز التناسلي، کما اشار (Badiei et al., 2000) إلى إن اصابة الماشية بحمة BVH-1 يتحرى عنها بشکل رئيس بوجود الاضداد الخاصة بالحمة، اختبار تعادل الحمة VNT واختبار الاليزا غير المباشر الذي يستخدم وبصورة واسعة للتحري عن وجود اضداد هذه الحمة في المصل ، کما ويمکن التحري عن وجود الاضداد في الحليب ، واشار (Hashemi et al., 2009) خلال عزل الحمة من حالات التهاب الانف والرغامى الخمجي والتهاب الفرج والمهبل. وبينت الدراسة التي اجريت في مصر(الجيزة) ان نسبة تواجد الاضداد باستخدام اختبار الاليزا غير المباشر هي (85.7%) في الحقول المغلقة المصابة يليها (66%) في الحقول المفتوحة لتربية الماشية ، وکذلک لاحظ ان نسبة انتشار المرض في الابقار السليمة ظاهرياً في الحقول المغلقة کانت (80%) و(62.5%) في الحقول المفتوحة المصابة بالمرض ، واشار (Hashemi et al., 2009) في دراسة مسحية على (120) عينة مصل من ابقار مجهضة في مختلف مراحل الحمل في منطقة مشهد في ايران ان نسبة تواجد اضداد حمة التهاب الانف والرغامى الخمجي البقري  التي تم التحري عنها باستخدام اختبار الاليزا غير المباشر بلغت (70%) في (84) عينة ، ولاحظ ان نسبة (36.9%,50%,13%) من العينات الموجبة حدثت خلال الثلث الاول والثاني والثالث من الحمل على التوالي.

يستنتج من هذه الدراسة  ان نسبة تواجد اضداد حمة التهاب الانف والرغامى في الحيوانات التي خضعت مصول دمائها لاختبار الاليزا غير المباشر مرتفعة وان استخدام هذا الاختبار فعال وحساس للکشف عن الاصابة.

REFERENCES

المصادر

Aboelzein, E.M.; Housawi, F.M.T.; Al-Faleq, A.L. and AL-Musa, J. (2008): Emergency of clinical infectious bovine rhinotracheitis in eastern  Saudi Arabia Rev. Elev. Med. Vet. Pays tropcau, 61(1): 11-13.

Ackermann, M. and Engles, M. (2006): Pro & contra IBR. Eradication, veterinary Microbiology, 113:293-302.

Badiei, K.; Ghane, M.M. and Mostaghni, K. (2000): Seroprevalence of bovine herpes virus type 1 in the  industrial dairy cattle herds in suburb of shiraz-iran, Australian, J. OF Basic & applied science, 4(10): 4650-4654.

Banenfus, M.; Dehlli, Quadri, C.A.; Mcinture, R.W. and Schroeder, R.J. (1963): Isolation of Infectiuos bovine rhinotracheitis virus from calves with meningeoencephalitis. AM. Vet. Med. Assoc., 143: 725-728.

Biuk-Rud an, N.S.; Cvertic, J.J.; Madic, and Rudan, D. (1999): Prevalence of  antibioticies to IBR anBVD virus  in dairy cows with  reproductive disorders, theriogenology 51: 875-881.

Eisa, M. (1983): Isolation of the virus of Infectious bovine rhinotrachitis in sudan. Sud. J. Vet. Res, 5: 65-68.

Engles, M. and Ackermann, M. (1996): Pathogenesis of   ruminant herpes virus infectious veterinary Microbiology, 53: 3-15.

Gazy, A.A.; Ahmed, W.M.; Mohmoud and Larina, A. (2007): Prevalence of infectious bovine rhinotrachitis &bovine viral diarrhea virus in female buffaloes with reproductive disorders & parasitic infection.international journal of dairy scince 2(4): 339-347.

Hashemi tabar, G.R.; Rad, M.; Naseri, Z. and Azizzadeh, M. (2009): Detection of antibody against infectious bovine rhnotrachitis glycoprotein IgE in aborted cattle in Mashhad, iran,Archives of Rad institutes, 64(2): 91-95.

Meyer, G.; Lemaire, M.; Ros, C.; Belak, K.; Gabriel, D.; Cassart, F.; Coignoul, S.; Belak, S. and Thiry, E. (2001): Comparative pathogenesis at  acute & latent infectious of calves with bovine herpes type 1 & Arch. Virol, 146: 633-652.

Miller, M.J. (1991): The effefts of IBR virus infection on reproductive function on cattle. Vet. Med., 86: 95-98.

Murphy, F.A.; Gibbs, E.P.J.; Horzined, M.C. and Student, M.J. (1999): Herpes-viridae. veterinary virology,3rd Edt. In Academic press,U.S.A.

Murphy, F.A.; Gibbs, E.P.J.; Horzined, M.C. and Student, M.J. (1999): Paramyxoviridae in veterinary virology, 3rd Edt. In Academic press ,U.S.A. ,p:423.

Muylkens, B.; Thiry, J.; Kirten, P.; Schynts, F. and Thirty, E. (2007): Bovine herpes virus, infection & infectious bovine rhinotracheitis, veterinary Research, 38: 181-209.

Nardelli, S.; Farina, G.; Lucchini, R.; Valocc, C.; Moresco, A.; Dalzotto, R. and Costanzi, C. (2008): Dynamics of infection &immunity in adairy cattle population undergoing an eradication program for infectious bovine rhinotraachitis preventive veterinary medicine, 85: 68-80.

OIE, (2010): Infectious bovine rhinotracheitis/ infectious pustular vuvlvovaginitis,vertion adopted by world assembly of  delegated of the OIE in may.,OIE, terrestrial manual 2010.

Parsomson, I.M. and Swowdow, W.A. (1975): The effected of natural & artificial breeding using bulls infected with, or semen containinated with infectious brain rhinotracheitis virus. Aust. Vet. J., 51: 365-369.

Pierre, P.; Robert, A.; Michel, T. and Paul, M. (1979): Enzyme-linked immunosorbent assay for serology of infectious bovine rhinotrachitis virus infectious. J. Clinic. Microbio. 10(5): 633-635.

Radostits, O.M.; Gay, C.C.; Hinchcliff, K.W. and Constable, P.D.  (2007): Veterinary Medicine a textbook of the disease of cattle, horses, sheep, pigs and goats., 10^th ed. Edinburgh, London, New York, Oxford, Philadelphia, St Louis, Sydney, Toronto, pp :926

Van Engelemburrg, F.A.; Maes, R.K.; Vanorschot, J.T. and Rusemuk, F.A. (1993): Development of  rapid & sensitive polymerase chain reaction assay for detection of bovine herpes virus type 1 in bovine semen. J. Clin. microbial, 31: 3129-3135.

  Van oirscha, J.T. (2000): Infectious bovine rhinotracheitis, infectious pustular vulvovaginitis in Manual of  standarts for diagnostic test &vaccines, 4^th ed. Paris office international des, epizootias, 381-391.

Winkler, M.T.; Doster, A. and Jones, C. (2000): Persistence & reactivation of bovine herpes virus -1 in  the tonsils of latently infected calves, J. Virology., 74: 5337-5346.

                                صورة 1: يبين وجود آفات على الفم والمخطم وسيلان اللعاب وتدمع

المناقشة

DISCUSSION

                                         صورة 3: يبين وجود آفات تقرحية على المهبل